Метод разработанный Саузерном

С помощью метода Саузерна можно составить рестрикционную карту генома в участке исследуемого гена и установить, несет ли данный ген какие-либо дефекты. Так, разработаны эффективные методы синтеза искусственных ДНК-зондов, которые используются в [c.36]

Цель данного этапа — выявить в каком из фрагментов находится интересующая нас последовательность ДНК. Это делают с помошью генного зонда. Поскольку зонд плохо продвигается в геле, используют метод, называемый Саузерн-блоттингом (Эдвард Саузерн разработал этот метод в 1975 г.). Последовательность операции представлена на рис. 25.32 (см. также раздел о генетической дактилоскопии, 25.7.12). [c.259]

Другую методику выявления ДНК на Саузерн-фильтрах разработали Черч и Гилберт [18] предложенный ими подход получил название геномного секвенирования. По сообщению авторов, метод позволяет детектировать 3 фг ДНК при 10-дневной экспозиции, что несомненно свидетельствует о достижении самой высокой на сегодня чувствительности метода. Подробные методики приводятся в отдельной работе [18]. В общих чертах этот метод состоит в использовании ДНК, пришитой с помощью ультрафиолетового облучения к найлоновым мембранным фильтрам, которую гибридизуют с высокорадиоактивной Р-меченной РНК в растворе, содержащем 1 % (весовая концентрация) БСА, 1 мМ ЭДТА, 0,5 М НаНРОд (pH 7,2) и 7% (весовая концентрация) додецилсульфата натрия (ДСН). Не ясно, какой именно фактор в данном случае обусловливает столь высокую чувствительность метода. [c.29]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология