ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Этапы и техника исследований из "Всасывание пестицидов через кожу и профилактика отравлений" Исследование действия нового вещества через кожу обычно проводят в несколько этапов. Начальным этапом является первичная оценка действия. [c.29] Главная задача ее установить, способно ли вещество проникать через неповрежденную кожу и вызывать токсический эффект при поступлении в организм этим путем. [c.29] В качестве критерия действия через кожу лучше использовать объективные показатели, а именно любой токсический эффект, вызываемый исследуемым веществом,— смертельный исход, время появления и степень выраженности признаков интоксикации и др. [c.29] В случае отсутствия токсического действия вещества при однократном воздействии следует провести опыты с повторными аппликациями на протяжении 7—10 дней. [c.29] Для первичной оценки проводят исследования на мышах и крысах, используют различные методы аппликации. Можно, например, наносить вещество на участок кожи, освобожденный от шерсти. Остановимся на наиболее распространенной методике с погружением хвоста мелких лабораторных животных в -раствор исследуемого вещества и последующей регистрацией его действия. Она имеет ряд преимуществ во-первых, в контакте с веществом находится значительная поверхность кожи по отношению к весу животного, во-вторых, легко исключить поступление его в организм другими путями (Н. С. Правдин, 1947). Кроме того, гистологическое строение кожи хвоста крысы весьма сходно со строением кожи человека. [c.29] Однако возможности этой методики все же ограничены. По сущ,еству, единственным количественным критерием является время гибели животных или появление тех или иных изменений. Учесть дозу вещества не представляется возможным. [c.30] За день до опыта хвост животного тщательно моют теплой водой с мылом с тем, чтобы устранить с поверхности струпья и грязь. В день опыта животное привязывают к дощечке или фиксируют в специальном станке (рис. 2), а хвост вводят на /з в обычную пробирку с исследуемой жидкостью. Пробирку закрывают пробковым кольцом. Внутренний диаметр пробкового кольца должен быть несколько большим, чем диаметр хвоста. Остающийся просвет можно закрыть парафином, размягченной менделеевской замазкой, пластилином или устранить другим способом. При этом важно следить за тем, чтобы хвост не был сдавлен. [c.30] Для исключения вдыхания паров вещества животное соответствующим образом помещают под вытяжку, опуская дверцу шкафа на штатив в вытяжном шкафу должен находиться лишь хвост животного, погруженный в пробирку с исследуемым веществом. В том же штативе и в тех же условиях должны находиться и контрольные животные с хвостами, опущенными в воду. [c.30] Общеизвестно, что эффект веществ, всасывающихся через кожу, с увеличением площади аппликации резко возрастает. Однако степень увеличения эффекта, по-видимому, для разных веществ будет неодинакова. Действительно, если вещества обладают различной скоростью всасывания через неповрежденную кожу, то, вероятно, это различие скажется и на степени повышения эффекта при увеличении площади аппликации. [c.31] Для высокотоксичных веществ площадь нанесения может быть значительно уменьшена, а для малотоксичных, соответственно, увеличена. Важно, чтобы в дальнейших исследованиях она была строго постоянной. При изучении ряда химических веществ для получения сопоставимых данных также необходимо придерживаться одного и того же размера площади аппликации. [c.31] Исследования на втором этапе также могут быть проведены на мелких лабораторных животных (крысы). [c.31] За день до опыта у животного на избранном для аппликации месте необходимо удалить шерсть. Это может быть сделано с помощью нанесения депилятория, бритья или стрижки. В последнее время депилятории в практике токсикологических лабораторий используются сравнительно редко, так как они могут существенно изменять проницаемость кожи. Бритье, в том числе и электрической бритвой, раздражает кожу и может травмировать ее. Наиболее приемлемым способом удаления щерсти является тщательная стрижка ножницами. На следующий день на подготовленный участок кожи животного заранее определенной площади (крысы — 2X2 см кролики, кошки — 4X6 см) наносят исследуемое вещество. [c.31] Из приведенного графика (рис. 3) видно, как резко повышается токсический эффект (ЛДбо уменьшается) с увеличением площади аппликацйи. Следует также отметить, что при меньшей площади аппликации различия в величинах ЛДбо более существенны. [c.32] Клиническая картина отравления при нанесении фосфорорганических веществ на большие площади характеризовалась более быстрым наступлением симптомов и более ранними сроками гибели животных по сравнению с теми, которые имели место при аппликации на меньшую площадь (0,8 см ). [c.32] На основании этих данных можно прийти к следующему заключению для выявления различия в эффекте веществ, всасывающихся через кожу, необходимо подобрать соответствующую величину площади аппликации. Высокотоксичные вещества, нанесенные на сравнительно большую площадь, оказывают столь массивное действие, что различия между ними выявить значительно труднее. [c.32] С целью ограничения площади аппликации используют и другие приемы. D. Noakes н D. Sanderson (1969) предложили тело животных (крысы) заворачивать в несколько слоев водонепроницаемого пластыря (создавалось подобие рукава) и вырезать в нем отверстие заданного размера. На этот открытый участок поверхности кожи в последующем наносят вещества. Для контроля за действительными размерами площади аппликации к изучаемому веществу добавляют краситель. Это способствует также выявлению случаев, когда животные слизывают вещества с места его нанесения. [c.33] Если за основную величину принять ЛД50, установленную при аппликации тиофоса на открытом участке кожи, то можно отметить, что при одних видах покрытия эта величина в 2— 4 раза увеличивалась, а при других (покрытие пластырем и алюминиевой фольгой)—в 3—4 раза уменьшалась. Следовательно, одни виды покрытий препятствовали всасыванию вещества через кожу, другие, наоборот, способствовали ему. При покрытии участка аппликации пластырем и алюминиевой фольгой выявлена наибольшая полнота всасывания тиофоса. Авторы рекомендуют именно этот метод для изучения всасывания веществ через кожу. [c.34] По нашему мнению, эти данные еще раз свидетельствуют о том, что для получения сопоставимых результатов условия проведения опытов должны быть одинаковыми и строго постоянными. Этого достичь легче, если избегать накладывания покрытий на участок аппликации, смывания вещества с кожи и других моментов, которые, как показывает опыт, стандартизировать трудно. [c.34] Нередко основное вещество в производственных условиях используется совместно с растворителями, наполнителями, эмульгаторами п другими вспомогательными веществами. Эти дополнительные компоненты могут существенно изменять токсическое действие вещества, в том числе и всасывание его через кожу (подробнее это описано в отдельной главе). Поэтому необходимо в эксперименте изучить действие основного вещества. [c.34] Для прогнозирования опасности веществ при попадании на кожу недостаточно данных, полученных в опытах с однократными аппликациями. В условиях длительного опыта при повторных аппликациях можно определить кумулятивный эффект того или иного вещества при поступлении его в организм через кожу, а следовательно, и возможность хронического отравления. [c.35] Вернуться к основной статье