ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Исходные материалы из "Методы исследования белков и нуклеиновых кислот Электрофорез и ультра-центрифугирование" Акриламид (СНг = СН — СОКНг) представляет собой белый кристаллический порошок. Хорошо очищенный продажный препарат содержит не более 0,05% акриловой кислоты. Его 5%-ный водный раствор должен иметь pH не ниже 5, а оптическая плотность 1%-ного раствора при 290 нм (А290) не должна превышать 0,15. Такой препарат можно использовать без дополнительной очистки или перекристаллизации. Акриламид следует хранить сухим, в темной посуде, предпочтительно на холоду. В этих условиях он может храниться до года. Акриламид токсичен (воздействует на кожу и нервную систему), поэтому отвешивать и растворять его следует в перчатках и под тягой. [c.7] Недостаточно чистый препарат можно пере кристаллизовать. [c.7] В случае необходимости Бис можно перекристаллизовать из ацетона (12 г/л) в тех же условиях, что и акриламид. Условия хранения и токсичность — такие же, как у акриламида. [c.8] Второй его конец может точно так же оказаться в составе другой линейной полимерной цепочки, и образуется сшивка . [c.9] Персульфат аммония в водном растворе постепенно разлагается, поэтому следует использовать только свежеприготовленные растворы. Сухой препарат хранится лучше, хотя и он медленно разлагается с вьщелением кислорода. Продажные препараты для электрофореза обьино достаточно хорошо очишеиы, но их следует проверять. Если 1%-ный раствор персульфата аммония в воде имеет pH 2, то он непригоден. Отметим попутно, что катион не играет роли в процессе инициации. Можно с успехом использовать, например, персульфат калия. [c.9] Рибофлавин представляет собой кристаллы в виде желтооранжевых игл. Он малорастворим в воде, но хорошо растворяется в слабош елочных водных буферах растворы имеют желто-зеленую окраску. [c.9] Рибофлавин также может служить инициатором полимеризации. При освеш ении его водного раствора видимым светом (445 нм) он присоединяет водород и восстанавливается до лей-корибофлавина. Последний снова легко окисляется растворенным в воде кислородом, образуя перекись водорода. За счет разложения перекиси продуцируются свободные радикалы (НО ), инициируюш ие цепную реакцию полимеризации акриламида. [c.9] К чистоте рибофлавина можно предъявлять не слишком строгие требования, так как он, являясь очень эффективным инициатором, используется в гораздо меньших концентрациях (-0,005%)), чем персульфат аммония. [c.9] Тетраметилэтилендиамин (ТЕМЕД) — (СНз)гК — СНг — СНг -— К(СНз)г — представляет собой бесцветную жидкость с плотностью 0,78 г/см Концентрация неразбавленного ТЕМЕД — около 6,7 М. [c.9] ТЕМЕД не является, собственно говоря, инициатором полимеризации акриламида, но служит катализатором этого процесса, заметно ускоряя его протекание. Он эффективен только в своей неионизированной форме, поэтому при полимеризации акриламида в кислой среде содержание ТЕМЕД следует значительно увеличить. В нейтральной или ш елочной средах ТЕМЕД можно вносить в количестве, эквимоляр ном по отношению к персульфату. [c.9] В качестве катализатора в последнее время нередко используют диметиламинопропио нитрил — (СНз)гК— СНг — СНг — СМ (М =10 2). Он более эффективен, чем ТЕМЕД, поэтому его вносят в три-четыре раза меньше, чем персульфата аммония. [c.9] Вернуться к основной статье