ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Вакцины на основе вирусных антигенов из "Генетическая инженерия" В том случае, когда главная (наиболее им-муногенная) антигенная детерминанта протек-тивного вирусного белка представлена непрерывной аминокислотной последовательностью, можно осуществить ее химический синтез и полученным синтетическим пептидом провести иммунизацию. Многочисленные эксперименты, выполненные в данном направлении, показали, что в некоторых случаях пептидные вакцины обеспечивают специфическую защиту организма от соответствующего вируса. [c.435] Хотя метод получения вакцин с использованием синтетических пептидов обладает значительными потенциальными возможностями, имеются и существенные сложности, связанные прежде всего со слабой антигенной активностью большинства индивидуальных пептидов из-за их малого размера. Усиления иммуно-генности таких пептидов часто удается добиться после связывания их с высокомолекулярными носителями (например бычьим сывороточным альбумином). Однако получение таких вакцин весьма трудоемко и дорого. [c.435] Разработка методов генетической инженерии позволила поставить вопрос о возможности получения высокоиммуногенных молекулярных вакцин против различных патогенных микроорганизмов, т. е. субъединичных или пептидных вакцин, синтезируемых в прокариотических или эукариотических клетках за счет экспрессии введенных в них чужеродных генов. Методы генетической инженерии обеспечивают принципиальную возможность наработки в больших количествах индивидуальных вирусных белков. [c.435] Для некоторых вирусов не удается подобрать условия их размножения на культурах клеток или в организме лабораторных животных и поэтому невозможно получить даже инактивированную вакцину. Ярким примером является вирус гепатита В, для которого не найдено культур клеток млекопитающих, обеспечивающих его наработку. Кроме человека к нему чувствительны только обезьяны шимпанзе. Поэтому данный вирус одним из первых привлек внимание исследователей. Встал вопрос, можно ли методами генетической инженерии создать молекулярную вакцину против заболевания гепатитом В. Многие лаборатории взялись за решение этой проблемы, что позволило в итоге добиться положительного результата. [c.435] Жесткая фиксация и многократное повторение антигенных детерминант на поверхности вирусных частиц обеспечивают их высокую иммуногенность. Синтезируемые же генно-ин-женерным способом индивидуальные протек-тивные вирусные белки, как правило, не формируют макроструктур и, в частности, поэтому обладают гораздо меньшими иммуногенными свойствами по сравнению с тем же белком, но входящим в состав вирусного капсида. Одним из первых доказательств этого положения являются результаты, полученные для вируса гепатита В человека. [c.435] В связи с низкой иммуногенностью индивидуальных вирусных белков возникла идея создания надмолекулярных вирусоподобных белковых структур, в которых многократно представлены те или иные антигенные детерминанты. При этом необходимо наличие белка-носителя, который при определенных условиях способен осуществлять самосборку вирусоподобных частиц. При встройке в заранее выбранный район гена белка-носителя кодирующей последовательности антигенной детерминанты изучаемого вируса можно надеяться на то, что детерминируемый таким гибридным геном химерный белок будет способен по-прежнему формировать надмолекулярные структуры и экспонировать на их поверхности чужеродные антигенные детерминанты. [c.436] Первый успех, имеющий практическое значение, достигнут Б. Кларком с соавторами (1987 г.). В качестве белка-носителя бьш использован коровый белок вируса гепатита В человека (HB Ag). При нормальном развитии вируса гепатита В около 200 молекул HB Ag формируют изометрическую частицу диаметром 27 нм, содержащую вирусный геном. Клонирование гена, кодирующего HB Ag, и экспрессия его в гетерологичной системе, включая Е. соИ, показали, что данный белок способен осуществлять самосборку и формировать без каких-ли-бо дополнительных компонентов вируса частицы, не отличимые по иммунологическим и морфологическим признакам от частиц, формируемых природным HB Ag. [c.436] Юхарк с соавторами сконструировали гибридный ген, в котором к последовательности, кодирующей HB Ag, подстроили в правильной рамке трансляции ген-эквивалент протективной антигенной детерминанты вируса ящура, представляющей собой последовательность 142-160 АК вирусного белка VP1. Детерминируемый гибридным геном химерный белок оказался токсичным для Е. соИ, поэтому он был синтезирован в культуре клеток животных V-1. Химерный белок формировал вирусоподобные частицы, которые после очистки от других белков проверяли на иммуногенность. Показано, что по иммуногенным свойствам полученные надмолекулярные структуры, в которых многократно представлены встроенные эпитопы, приближаются к частицам вируса ящура (табл. 17.1). В то же время химерный белок /3-галактозидаза — протективный эпитоп белка VP1 вируса ящ)фа /3-Gal/(137-162 АК)г, а тем более синтетические пептиды обладали значительно меньшей иммуногенной активностью по сравнению с частицами, формируемыми химерой HB Ag/142-160 АК. [c.436] Данная работа показывает перспективность создания вирусоподобных комплексов, способных экспонировать на своей поверхности чужеродные антигенные детерминанты, для получения безопасных молекулярных противовирусных вакцин. Тем не менее важнейшим направлением научных изысканий остается разработка и совершенствование новых типов живых вакцин, поскольку они индуцируют сбалансированный гуморальный и клеточный иммунный ответ. [c.436] Вернуться к основной статье