ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Молекулярные векторы на основе генома вируса папилломы быка из "Генетическая инженерия" При введении клонированных генов в клетки млекопитающих в процессе генетической трансформации множественные копии этих генов интегрируются в геном клетки. У независимо отобранных трансформированных клеток места интеграции чужеродной ДНК в хромосомы различаются. Это может приводить к тому, что уровень экспрессии введенных генов в разных клонах будет варьировать за счет влияния прилегающих участков хромосом (эффект положения гена). Одна из возможностей преодолеть данные затруднения возникла в 1981 г. после создания векторов на основе ДНК вируса папилломы быка типа 1 (BPV-1). [c.366] В отличие от вирусов рода Polyomavirus у BPV-1 транскрипция ранних и поздних генов происходит с одной це вирусной ДНК и направлена в одну сторону. Идентифицированы промоторы в положениях 89, 890, 2443, 3080, 7185, 7250, 7940 пн. В результате альтернативного сплайсинга образуется большой набор зрелых мРНК размером 1-4 тыс. нуклеотидов (рис. 14.12). [c.366] В скобках указано положение сайтов рестрикции (пн). [c.367] ОРТ в фазах 1,2 и 3 обозначены прямоугольниками. Цифрами указаны координаты соответст ющих ОРТ на нуклеотидной последовательности вирусной ДНК (о). Сплошными линиями обозначены зрелые формы мРНК, пунктиром — области интронов. Цифрами обозначены координаты сплайсинга соответствующих мРНК (б). [c.368] Одним из ограничений рассмотренной векторной системы следует признать то, что селективным маркером является фенотип онкогенно трансформированных клеток. Только линии клеток, чувствительные к трансформации, обусловливаемой вирусом папилломы быка, являются подходящими реципиентами для сегментов чужеродной ДНК, объединенных с трансформирующей областью BPV-1. Соединение доминантных селективных маркеров с ДНК вируса папилломы позволяет расширить круг хозяев для этой векторной системы. [c.370] Вернуться к основной статье