ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Плазмидные интегративные векторы из "Генетическая инженерия" Встройку чужеродных генов в геном клетки осуществляют с помощью специализированных плазмид, называемых векторами интеграции. Классическим вектором данного типа является плазмида, не способная реплицироваться в исследуемых клетках, но имеющая в своем составе сегмент ДНК, гомологичный определенному району бактериальной хромосомы. Многочисленные эксперименты показали, что плазмиды интеграции способны с высокой эффективностью рекомбинационно встраиваться в геном В. subtilis. При этом интеграция является гесЕ-зависимой и в большинстве изученных случаев происходит по модели Кэмпбелла, т. е. кольцевая молекула ДНК рекомбинирует с гомологичным участком бактериальной хромосомы в одной точке (участке) и целиком встраивается в геном клетки. [c.257] Векторы рассматриваемого типа обычно содержат репликон, функционирующий в клетках Е. соИ, а также детерминанты устойчивости к антибиотикам, хотя бы одна из которых экспрессируется в В. subtilis. Интегративные трансформанты В. subtilis выявляют по функциям этих плазмидных детерминант. Используя интегративные векторы, можно любые чужеродные гены ковалентно встраивать в геном бактериальной клетки. [c.257] В результате внутримолекулярной рекомбинации тандемные повторы могут вьпцепляться. Поэтому амплифицированное состояние сегментов ДНК стабильно поддерживается лишь в условиях селективного давления по маркеру, обеспечившему отбор таких вариантов. [c.258] Вернуться к основной статье