ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Фаговый дисплей антител из "Генетическая инженерия" Цепи иммуноглобулинов свернуты в не-сголько глобулярных структур, называемых доменами (см. рис. 4, а, цв. вклейка). N-концевые домены легкой и тяжелой цепей иммуноглобулина являются вариабельными и обозначаются соответственно Vl и Vh. С-концевой домен легкой цепи является константной частью и обозначается l. Тяжелые цепи содержат по три константных домена Сн1, Сн2 и СнЗ. [c.200] Каждый иммуноглобулин выполняет две функции. Одна область его молекулы предназначена для связывания с антигеном, а другая осуществляет так называемые эффекторные функции. К ним относится связывание иммуноглобулина с тканями организма, различными клетками иммунной системы и белками системы комплемента. Антигенсвязывающие центры образованы вариабельными участками цепей Ig. Протеолитический фермент папаин расщепляет молекулу IgG на три фрагмента два анти-генсвязывающих Fab и один Рс. [c.200] Оказалось, что с помощью технологии фагового дисплея можно на поверхности вирионов нитевидных фагов представлять РаЬ-фраг-менты иммуноглобулинов. Для этих целей обычно используют систему клонирования типа 3 + 3 (см. 7.5.3). В фагмиде конструируют ген, в котором последовательность, кодирующую легкую или тяжелую цепь РаЬ-фрагмента IgG, объединяют в правильной рамке трансляции с геном III. Вторая, дополняющая полипеп-тидная цепь РаЬ-фрагмента экспрессируется в свободном виде. При этом обе целевые кодирующие последовательности состыковывают с ген-эквивалентом сигнальных пептидов (рис. 7.10, а). После секреции в периплазматическое пространство клетки Е. oli обе цепи ассоциируют и образуют активный РаЬ-фраг-мент (см. рис. 7.10, б). [c.200] Отобранные методом фагового дисплея гены РаЬ-фрагментов с высокой аффинностью к целевому антигену могут быть затем использованы для реконструкции кодирующей последовательности молекулы полного иммуноглобулина человека. Экспрессируя такой ген в эукариотической системе, можно получать высокоэффективные моноклональные человеческие антитела. В отличие от классических моноклональных антител, получаемых в организме животных, они не будут вызывать в организме человека активный антиглобулиновый иммунный ответ, а значит, представляют большой интерес для терапевтического использования. [c.202] Щелкунов С. Н. Вирус натуральной оспы — источник новых медицинских препаратов // Соросов-ский образовательный журн. 1995. 1, С. 28-31. [c.202] Вернуться к основной статье