ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Диагностика повреждения растительной ткани по увеличению ее проницаемости из "Практикум по физиологии растений Изд.3" Порядок работы. Из очищенного корнеплода красной свеклы сверлом диаметром 0,7... 0,8 см берут куски цилиндрической формы высотой 4 см. Их тщательно промывают под струей водопроводной воды и помещают по одному в пять пробирок, содержащих по 10 мл различных растворов в соответствии со схемой опыта. [c.9] Вариант опыта с кипячением выполняют следующим образом. В колбу с кипящей водой бросают один из приготовленных кусочков. Через 2 мин кусочек вынимают, охлаждают и опускают в пробирку с 10 мл холодной водопроводной воды. [c.9] Через 30 мин после начала опыта все пробирки интенсивно встряхивают, кусочки свеклы извлекают и сравнивают количество вышедшего из клеток пигмента в разных вариантах опыта при помощи фотоэлектроколориметра (ФЭК) па синем светофильтре. При этом в контрольную кювету ФЭК наливают тот раствор, действие которого изучают. Интенсивность окраски устанавливают по коэффициенту экстинкции на шкале ФЭК. [c.9] Для наблюдения за состоянием клеток из кусочка свеклы контрольного варианта и варианта с наиболее интенсивным выходом веществ готовят тонкие срезы, помещают их на предметные стекла в каплю 1 М раствора КНОз, накрывают покровным стеклом и рассматривают под микроскопом. Зарисовывают клетки срезов двух вариантов, находящиеся под действием плазмолитика. Результаты опыта записывают по форме (табл. 2). [c.9] Материалы и оборудование. Красная свекла, хлороформ, 30%-й раствор уксусной кислоты, 50%-й раствор спирта, 1 М раствор КНОз. [c.10] Вводные пояснения. При повреждении растительной ткани увеличивается сродство цитоплазмы к красителям. На этом основаны методы определения жизнеспособности семян по окрашиванию их зародышей витальными красителями. Жизнеспособными считаются те семена, зародыши которых не окрашиваются. [c.10] Порядок работы. Метод Н е л ю б о в а. Этим методом устанавливают жизнеспосо бность семян гороха, фасоли, люпина, конопли и тыквенных. [c.10] Берут 10...15 семян гороха, предварительно намачивают в течение 18 ч при 20 °С, освобождают от семенной оболочки, помещают в 0,2%-й раствор индиго-кармина на 2... 3 ч при 30 °С. Затем краску сливают, промывают семена водой и устанавливают их жизнеспособность. [c.10] Семена с неокрашенными корешками и слабо окрашенными семядолями относят к жизнеспособным. Семена с полностью окрашенными корешками и семядолями признают нежизнеспосббными. [c.10] Метод Иванова, Для определения берут десять зерновок пшеницы, предварительно намачивают в воде в течение 10 ч при комнатной температуре, разрезают бритвой вдоль бороздки пополам и помещают иа 15 мин в 0,2%-й раствор кислого фуксина или 0,1 %-й раствор индиго-кармина, налитый в стаканчик или бюкс. Краску сливают, промывают семена водой, размещают пинцетом на фильтровальной бумаге н определяют жизнеспособность. У жизнеспособных семян зародыши не окрашены, у мертвых или сильно поврежденных окрашены более или менее интенсивно. [c.10] Зарисовывают жизнеспособные и нежизнеспособные семена. По результатам ра боты делают выводы. [c.10] При определенной величине pH среды диссоциация по уравнениям, I и П подавлена в одинаковой степени. Количество положительных и отрицательных зарядов уравновешивается. Амфолит становится электроиейт-ральным. Данное значение pH среды называют изо-электрической точкой, (ИЭТ). [c.11] Каждый амфолит имеет свою величину ИЭТ. У белков и аминокислот она зависит от количества свободных кислотных (карбоксильных), основных (амииных) групп. Зная ИЭТ белков, можно судить о соотношении в их составе кислых и основных амино кислот. В тех случаях, когда в растворе амфотерного соединения диссоциация идет по типу основания (в средах с pH ниже ИЭТ), положительный заряд будет связывать анионы. Если диссоциация идет по кислотному типу (в средах с pH выше ИЭТ), отрицательный заржд связывает катионы. [c.11] Для определения изоэлектрической точки растительной ткани применяют кислый чраситель эозип, у которого розовой окраской обладает анион, и основной краситель метиленовую синюю (МС), цвет которого обусловлен катионом. При окрашивании амфотерного соединения этими красками и погружении в среды, pH которых ниже ИЭТ, связываются преимущественно анноны эозина. Поэтому раствор приобретает розовую окраску. В среде, где pH выше ИЭТ, амфолит удерживает катион метиленовой синей и окрашивается в сииий цвет. В среде с pH, равным ИЭТ, окраска амфолита будет промежуточной между розовой и синей — фиолетовой, так как в этом случае количество отрицательных и положительных зарядов одинаково. [c.12] В цитоплазме содержится смесь растворов амфотер- ных соединений, поэтому переходная зона между розовой и синей окраской будет соответствовать более или менее широкому интервалу pH. [c.12] Вернуться к основной статье