ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Растворимость белков при низкой концентрации солей из "Методы очистки белков" Изоэлектрическое осаждение белков с низкой растворимостью можно усилить введением в раствор вещества, снижающего растворимость белка. Осадок можно получить, добавляя в раствор органические растворители или полиэтиленгликоль и одновременно изменяя значение pH (разд. 3.4 и 3.5). Примером использования такого метода служит очистка фосфофруктоки-назы дрожжей [17]. [c.60] Увеличение растворимости белка (при данных pH и температуре) с повышением концентрации соли известно как всали-вание . При очистке ферментов чаще используется обратный процесс, осуществляемый путем разведения и диализа. Типичная кривая всаливания чистого белка дана на рис. 3.4. Чтобы при разбавлении раствора могло произойти осаждение белка, кривая зависимости растворимости от концентрации соли должна иметь достаточную крутизну. [c.60] Подводя итог всему сказанному выше, следует отметить, что область всаливания может быть использована в процессе очистки двумя способами. Во-первых, агрегация может происходить при разведении и диализе, и, если нужный фермент присутствует в агрегате, очистка будет эффективной. Во-вторых, можно применять изоэлектрическое осаждение, используя изменение растворимости в зависимости от pH при постоянной ионной силе. В любой из этих двух ситуаций степень достигнутой очистки обычно оказывается минимальной, если нужный фермент остается в растворе, так как при этом в осадок выпадает чаще всего лишь относительно незначительная часть всего белка. В этом случае достигается только осветление экстракта (разд. 2.3). [c.61] Вернуться к основной статье