ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Нейраминидаза из "Генетика вирусов гриппа" При помощи клонированной ДНК были получены полные последовательности для сегментов РНК вируса B/Lee/40 — 7-го [12], 8-го [И], 4-го (39] и 6-го (94]. Опубликованные данные о терминальных последовательностях РНК вируса гриппа В представлены в табл. 30 и 31 и свидетельствуют о возможно большей разнородности по сравнению с уже рассмотренными терминальными последовательностями вирусов гриппа А. Это достаточно неожиданно в свете относительно слабой антигенной изменчивости вируса гриппа В по сравнению с вирусами гриппа А. [c.274] И NA вируса В/ОЬ/1760/54 оказались отчасти крупнее (м. м. 82000, 66 000 и 64000 соответственно), хотя белок М был меньше (м. м. 24000) по сравнению с соответствующими белками А/ УЗК/33 [14, 16]. Очень близкие к этим значения были получены в более позднем исследовании белков В/Ьее/40 [83]. [c.275] Белок НА вируса гриппа В подвержен протеолитическому расщеплению на НА1 и НА2, как и полипептиды НА вируса гриппа А. Кливедж может быть имитирован трипсином, но явно не плазмином [14]. Оба полипептида — НА1 и НА2 — содержат глюкозамин, но НА2 из B/GL/1760/54 не содержит фукозу, хотя этот сахар присутствует в НА2 вирусов гриппа А [14]. Это свидетельствует, что олигосахариды, связанные с субъединицей НА2 вируса гриппа В, относятся к простому, богатому маннозой типу. [c.276] Waterfield и соавт. [102], изучив последовательности N-терминальных участков НА1 ц НА2 B/Lee/40, выявили наличие гомологии с последовательностями НА1 и НА2 вируса гриппа А. [c.276] При сравнении последовательностей вирусов гриппа B/Lee/4Q и A/PR/8/34 [109] обнаружено наличие 24% и 39% консервативности аминокислот в НА1 и НА2 соответственно. При сравнении последовательностей вирусов A/PR/8/34 и A/Ai hi/2/68 [100] консервативность была представлена 35% и 53% таким образом, последовательность НА вируса гриппа В, несмотря на имеющиеся отличия, все-таки имеет определенные гомологии с последовательностями НА известных вирусов гриппа А. Тринадцать цистеиновых остатков у B/Lee/40 и A/PR/8/34 могут быть выстроены в одну линию только лишние цистеиновые остатки находятся в сигнальном пептиде и очень близки к С-терминалу НА2 вируса A/PR/8/34. Ни один из них не включен в глобулярную структуру НА. Таким образом, вполне вероятно, что основная трехмерная структура НА вируса гриппа В будет подобна таковой для вируса гриппа A/Ai hi/2/68 [107]. [c.277] Имеется единственное сообщение об аминокислотном строении NA вируса гриппа В [46]. Однако аминокислотная последовательность может быть предсказана на основании последовательности клонированной кДНК-копии вирусной или мессенджер-РНК [94]. Клонированная ДНК содержит 10 нуклеотидов, полученных от клеточной РНК за счет процесса переноса кэпа , который является общим для вирусов гриппа А и В [37]. [c.277] Вирусспецифическая часть клона NA вируса B/Lee/40, секве-нированного М. Shaw и соавт. [94], содержит в длину 1557 основных пар. Первый кодон АУГ расположен с 47-го по 49-й нуклеотид, а открытая рамка считывания для трансляции, которая начинается этим кодоном, заканчивается после нуклеотида 346. Подобная рамка должна давать белок с м.м. только 11242, что несовместимо с известным размером белка NA. Второй кодон АУГ расположен на участке с 54-го по 56-й нуклеотид и следует за открытой рамкой считывания, простираясь до двух последовательных терминирующих кодонов с 1452-го по 1457-й нуклеотид предполагают, что именно этот второй кодон АУГ является инициирующим сайтом для трансляции NA. Трансляция, начинаясь в этом кодоне, будет давать белок, состоящий из 466 аминокислот с м. м. 51 721, что соответствует размеру NA. Белок должен содержать четыре сайта потенциального гликозилирования (т. е. аспарагин, за ним — неопределенная аминокислота, за ней — серин или треонин), которые обнаруживаются в аминокислотах 56, 64, 144 и 284. Аминокислотное строение, предсказанное по нуклеотидной последовательности, хорошо согласуется с результатами аминокислотного анализа очищенной NA вируса гриппа B/Lee/40 [46]. [c.277] Нейраминидаза вируса А имеет область, близкую к К-терми-таалу, которая прикрепляет белок к вирусной мембране [9, 23], и подобно тому в КА вируса В/Ьее/40 единственный гидрофобный сегмент, достаточно длинный для образования мостика к мембране, простирается с 4-го по 34-й остаток. За этой областью следует участок, который должен соответствовать тонким ножкам, обнаруживаемым на электронных микрофотографиях, и который в случае последовательности вируса В/Ьее [94] содержит сайты гликозилирования и цистеиновые остатки, как уже было замечено для КА различных подтипов вируса гриппа А [7]. [c.278] Примечание. Остатки пронумерованы, начиная с инициирующего метиони-нового остатка, который для некоторых штаммов вируса гриппа А является К-тер-минальным остатком белка [9]. Номера остатков на одних и тех же линиях соответствуют цистеинам, последовательности вокруг которых гомологичны [94]. [c.278] Вернуться к основной статье