ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Определение pH питательных сред из "Микробиология с техникой микробиологических исследований изд.4" Таким образом, значения Н+ и 0Н связаны с постоянной величиной произведения изменение одной из них влечет за собой соответствующее увеличение или уменьшение другой. Вследствие этого для характеристики реакции среды достаточно определить в растворе содержание каких-либо одних ионов — водородных или гидроксильных. В настоящее время принято определять реакцию среды по содержанию в ней ионов водорода. [c.38] Определение pH раствора производят колориметрическим и электрометрическим способами. В микробиологических лабораториях преимущественное распространение получил первый из упомянутых способов. [c.39] Определение pH среды колориметрическим способом. В основу колориметрического определения pH положена способность некоторых веществ, называемых индикаторами, изменять цвет или интенсивность окраски в зависимости от pH раствора. В связи с этим две жидкости с одинаковой толщиной слоя, содержащие один и тот же индикатор, могут иметь полное совпадение цвета только при равных значениях pH. Для колориметрического определения pH в растворе пользуются обычно прибором Уольполя—Михаэлиса, представляющим собой компаратор и набор индикаторов. [c.39] Второй ряд стандарты для паранитрофенола — 9 пробирок (pH 5,4—7,0). [c.40] Третий ряд стандарты для гамма-нитрофенола— 8 пробирок (pH 4,0— 5,4). [c.40] Четвертый ряд стандарты для альфа-нитрофенола — 9 пробирок (pH 2,8—4,4). [c.40] На каждой пробирке стандарта наклеена этикетка, обозначающая величину pH, которой соответствует данный стандарт. Разница pH двух рядом стоящих пробирок соответствует 0,2. Набор имеющихся индикаторов и прилагаемые к ним стандарты допускают определение pH раствора в пределах 2,8—8,4. [c.40] Наряду с перечисленными индикаторами, предназначенными для точного определения pH, в пробирке имеется так называемый универсальный индикатор для ориентировочного-определения pH исследуемых жидкостей. К нему прилагается фарфоровая палетка и разноцветная шкала на бумажной-карточке. Каждая цветная полоска этой шкалы соответствует определенному значению pH универсального индикатора . [c.40] В отверстие 5 помещают пробирку с 7 мл дистиллирован-яой воды, а с обеих ее сторон, в отверстия 4 и б, стандарты с тем же индикатором, который добавлен к исследуемой среде. Стандарты подбирают до тех пор, пока интенсивность их окраски и исследуемой жидкости не станет одинаковой. [c.41] При исследовании растворов, окращенных в желтый цвет, в компаратор вставляют светофильтр синего цвета. Жидкость при этом приобретает зеленый цвет, оттенки которого улавливаются значительно легче, чем желтого. При работе с мутной жидкостью вставляют матовый светофильтр, скрывающий мутность исследуемой среды. [c.41] Приготовление растворов с определенным значением pH. Приготовление раствора (среды) с определенной реакцией начинают с ориентировочного определения в нем pH с помощью универсального индикатора . Если pH ниже заданного, раствор подщелачивают, если выше — подкисляют. В первом и втором случаях точно учитывают количество кислоты или щелочи, истраченной на изменение pH до нужного значения. [c.41] Расстановка пробирок в компараторе при приготовлении раствора с определенным значением pH такая же, как описано выще. Однако в гнездах 4 и б устанавливают стандарты с заведомо определенным значением pH, которое нужна создать в опытном растворе. Например, для установления в растворе р Н 7,3 берут стандарты pH 7,2 и 7,4. [c.41] В опытную пробирку 2 градуированной пипеткой прибавляют по каплям децинормальный раствор едкого натра для подщелачивания или децинормальный раствор хлористоводородной кислоты для подкисления до тех пор, пока цвет содержимого в опытной и стандартной пробирках не совпадет полностью. За изменением цвета в опытной пробирке наблюдают все время через отверстие, расположенное на передней стенке у основания щтатива. [c.41] Для уточнения полученных данных исследование повторяют. К опытному раствору прибавляют заранее то же количество кислоты или щелочи и повторно проверяют величину полученного значения pH. [c.41] Пример. Чтобы установить в 2 мл мясо-пептонного бульона pH 7,6, понадобилось 0,2 мл децннормального раствора едкого натра. Следовательно, на 1000 мл того же раствора едкого натра нужно в 500 раз больше. [c.42] При стерилизации питательных сред в автоклаве pH, как правило, снижается, поэтому перед стерилизацией pH среды превышают обычно на 0,2 выще требуемой величины и после автоклавирования реакцию среды проверяют повторно. [c.42] Фильтрование питательных сред. Жидкие и желатиновые питательные среды фильтруют через фильтровальную бумагу, среды с агаром — через ватно-марлевый фидьтр. Перед фильтрованием монтируют вспомогательную установку. В кольце универсального штатива закрепляют воронку, под трубку ее подставляют приемник для фильтрата. [c.42] Ватно-марлевые фильтры для агаровых сред готовят следующим образом. Стеклянную воронку покрывают квадратным куском марли, углы которой перегибают через край воронки. На марлю кладут слой гигроскопической ваты. Перед началом фильтрования поверхность ватно-марлевого фильтра, так же как и бумажного, осторожно смачивают дистиллированной водой или фильтруемой средой. [c.42] Вернуться к основной статье