ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Сложные дифференциальные методы окраски из "Микробиология с техникой микробиологических исследований изд.4" При сложных способах окраски на мазок воздействуют двумя красящими веществами, из которых один является основным, а другой—дополнительным. Кроме красящих веществ, при сложных способах окраски применяют различные обесцвечивающие вещества спирт, кислоты и т. д. [c.30] Отношение микроорганизмов к окрашиванию по Граму имеет большое диагностическое значение. [c.31] Результаты окраски. Грамположительные бактерии окрашиваются основным красителем в темно-фиолетовый цвет, грамотрицательные бактерии, воспринимая дополнительную окраску, приобретают ярко-малиновый цвет. [c.31] В настоящее время более широкое применение в практике бактериологических исследований находит видоизмененный способ окраски Грама по Синеву. [c.31] Основной краситель в виде раствора заменяют фильтровальной бумагой, пропитанной 1% спиртовым раствором кристаллического фиолетового (см. технику приготовления красящей бумаги по Синеву, с. 345). На препарат помещают красящую бумажку и наносят на нее 2—3 капли воды. Окрашивание идет в течение 1—2 мин. Затем бумажки снимают и дальнейшую окраску препарата ведут общепринятым способом. [c.31] Окраска кислотоустойчивых бактерий. Кислотоустойчивыми называют тех микробов, которые, будучи окрашены карболовым фуксином, не обесцвечиваются под действием концентрированных минеральных кислот. Особенностью микробов этой группы является то, что они плохо воспринимают окраску. [c.31] Для того чтобы окрасить кислотоустойчивые микроорганизмы, приходится применять более концентрированные растворы красителя в подогретом состоянии с протравами и удлиненным сроком окраски. [c.32] К кислотоустойчивым патогенным микробам относятся возбудители туберкулеза (см. рис. 29) и проказы. [c.32] Методика окраски. 1. Фиксированный на пламени горелки мазок окрашивают в течение 3—5 мин раствором карболового фуксина Циля или окрашенной фуксином бумажкой с подогреванием до появления паров, по не доводя краситель до кипения. [c.32] При окраске препаратов по методу Циля — Нильсена кислотоустойчивые бактерии окрашиваются фуксином в рубиново-красный цвет и не обесцвечиваются кислотой. [c.32] Некислотоустойчивые бактерии, а также элементы ткани и лейкоциты под действием кислоты становятся бесцветными и приобретают цвет дополнительного красителя. [c.32] Окраска по Романовскому — Гимзе. Краситель Романовского—Гимзы состоит из смеси азура, эозина и метиленового синего. Непосредственно перед употреблением к 10 мл дистиллированной воды (pH 7,0—7,2) прибавляют 10 капель имеющегося в продаже красителя Романовского — Гимзы. Приготовленный раствор красителя тотчас наливают на фиксированный мазок или предметное стекло с окрашиваемым. препаратом погружают в стаканчик с красителем. Через час краситель сливают, препарат промывают водой и высушивают па воздухе. [c.32] Краситель Романовского — Гимзы, имеющий в растворе сине-фиолетовый цвет, окрашивает цитоплазму форменных элементов ткани в голубовато-синий цвет, а ядра клеток, так же как и микробные тела, в фиолетово-красный (см. рис. 30). [c.32] Плотная оболочка спор, непроницаемая для воды, окрашивается с большим трудом, поэтому при обычных методах окраски споры имеют вид неокрашенных пустот внутри клетки. Для окраски спор пользуются специальными методами с применением протрав (кислоты или щелочи). Протравы разрыхляют оболочку споры, облегчая проникновение в нее красителя. Окрасившиеся споры обладают кислотоустойчи-востью в отличие от вегетативного тела микробной клетки, обесцвечивающегося под действием кислоты. Поэтому принцип окраски спор и кислотоустойчивых бактерий одинаков препарат окрашивают основным красителем, затем обесцвечивают кислотой и докрашивают дополнительно в какой-ни-будь контрастный цвет. [c.33] окрашенные фуксином, имеют рубиново-красный цвет, вегетативные тела микробных клеток при докрашивании синькой Леффлера — синий цвет, при применении малахитового зеленого — зеленый цвет. [c.33] Для выявления капсул применяют специальные способы окраски. [c.34] Выявление капсул по способу Б у р р и. Неузкий конец предметного стекла наносят каплю туши и петлю исследуемого материала. Смесь тщательно перемешивают петлей, делают мазок, как мазок из крови, высушивают и, не фиксируя, микроскопируют с иммерсионной системой. Фон препарата окрашен в темно-дымчатый цвет, микробные тела и их капсулы не окрашиваются тушью и остаются бесцветными, вследствие чего этот способ получил название негативного. [c.34] Окраска капсул по способу Гинса. 1. Приготовляют негативно окрашенный по способу Бурри препарат. [c.34] При микроскопировании на темном фоне препарата контрастно выделяются неокрашенные капсулы, внутри которых находятся бактерии ярко-малинового цвета. [c.34] Вернуться к основной статье