ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ из "Антитела Методы Т.1" В 1890 г. фон Беринг и Китасато [1] изготовили бактериальные антитоксины и продемонстрировали их нейтрализующие свойства. Это открытие положило начало эпохе серологических исследований, замечательной своими достижениями. Были изучены свойства и роль антител и комплемента при бактериальных инфекциях, а также диагностическая ценность антисывороток при таких, например, заболеваниях, как брюшной тиф (реакция Видаля, 1896 г.) и сифилис (реакция Вассермана, 1906 г.). Успешно развивающаяся в настоящее время серодиагностика (область микробиологии) следует традициям этих первых открытий. Если антитела возникли как основное средство защиты от инфекций, можно было бы предположить, что их применение ограничится этой сферой и будет сведено к диагностике инфекционных заболеваний. Однако плодотворные исследования в других направлениях вскоре показали, что диапазон специфичности антител поистине безграничен, и их можно использовать не только для изучения антигенов микроорганизмов, но и для определения, выделения и количественной оценки огромного числа иммуногенных молекул. Иммуно-генными, действительно, оказались в первую очередь наиболее сложные молекулы с мол. массой более 5000, чужеродные для иммунизируемых видов, однако в 1936 г. Ландштейнер [2] показал, что и молекулы меньших размеров (гаптены), конъюгированные с более крупным носителем, вызывают образование антител, обладающих необходимой специфичностью. [c.11] Принцип совмещения электрофоретической миграции антигена в агаре с его преципитацией под действием антител был развит в 1966 г. Лореллом [И], который разработал метод ракетного иммуноэлектрофореза для быстрой оценки количества индивидуальных антигенов в смеси с помощью моноспецифических антител, введенных в гель, а также двумерный (перекрестный) иммуноэлектрофорез, позволяющий оценить как качественный, так и количественный состав сложной смеси антигенов с помощью полиспецифических антисывороток. [c.12] Несмотря на то что методы преципитации в геле занимают значительное место в изучении и количественном определении антигенов, а также широко применяются для контроля специфичности и определения титра преципитирующих антител, предел чувствительности данных методов составляет около 5 мкг/мл, и их невозможно использовать для количественного определения антигенов небольшой мол. массы, которые образуют только нерастворимые комплексы. По этой причине возникла необходимость в разработке альтернативных методов количественного определения антигенов. В 1945 г. Кумбс и сотр. [c.12] Следующий этап в истории создания чувствительных методов иммунологического анализа связан с открытием Фарром в 1958 г. [13] и Яллоу и Берсоном в 1960 г. [14] технологии мечения антигенов, антител и небольших пептидных гормонов радиоизотопами. Радиоиммунологический анализ позволил определять чрезвычайно малые концентрации (вплоть до пмоль/л) таких молекул, как инсулин, и выдвинул новые специальные требования к технологии получения антисывороток. Для иммунизации животных стали использоваться конъюгаты гаптенов (гормонов) с молекулами-носителями. Именно этим способом удалось получить антитела с такой степенью специфичности и аффинности, какая раньше никогда не требовалась. [c.13] Ценность антител к компонентам клеточной поверхности заключается не только в их способности селективно уничтожать или идентифицировать клеточные популяции, но и в возможности определения конкретных молекул-мишеней. В настоящее время с помощью антител можно выделить компоненты, входящие в состав клеточных мембран, и определить их природу путем аффинного мечения после разделения в полиакриламидном геле. Такие методы лежат в основе современных исследований во многих областях клеточной биологии. [c.15] Прошло уже почти сто лет с того дня, как в процессе изучения бактериальных инфекций были открыты антитела. За это время методы, основанные на их использовании, радикальным образом расширили наши возможности идентификации различных молекул и изучения их свойств (см. табл. В.1). [c.15] В этой книге в логической последовательности изложены методы получения и применения антител. Поскольку эта область достаточно широка, а темпы развития новых методов и технологий очень велики, некоторые аспекты неизбежно должны были быть исключены из рассмотрения. Мы сосредоточили внимание на детальном описании самых популярных и наиболее часто используемых методов, осваивая которые можно быстро овладеть основными принципами работы с антителами. Вторая цель, которую мы преследовали, заключается в описании методов, представляющих самостоятельную ценность для прикладных исследований, а также тех, которые имеют большое клиническое значение в областях, где в настоящее время происходит особенно быстрое накопление знаний, и, следовательно, нуждающихся в проверке современной лабораторной практикой. [c.15] Определение индивидуальных антигенов в сложных смесях в растворах. Определение степенн чистоты выделенных антигенов. [c.16] Определение областей продукции, экспрессии, локализации и активности антигенов в клетках н тканях. [c.16] Определеиие взаимосвязи структуры и функции аитигеиов, например в случае ферментов, антител, гормонов, цитокинов и клеточных рецепторов. Определение дифференцировочных и онкофетальных клеточных антигенов. Идентификация клеточных популяций, включая опухолевые. [c.16] Распознавание аллельных антигенов одного локуса — вапример, главного комплекса гистосовместимости. [c.16] Определение антигенных взаимосвязей между молекулами — например, различного видового происхождения, между гормонами и т. д. [c.16] Типирование лимфоцитов (HLA). [c.16] Типирование эритроцитов (групп крови). [c.16] Антигенная диагностика паразитарных, грибковых, бактериальных и вирусных инфекций путем выявления возбудителей или продуктов нх жизнедеятельности в крови, мокроте, моче, кале, спинномозговой жидкости и т. д. Серологическое определение типов и подтипов бактерий и вирусов. Определеиие антигенных вариаций и генетических конверсий у паразитов. Идентификация инфекционных агентов или их антигенов у переносчиков кли хозяев. [c.16] Компоненты плазмы крови, имеющие диагностическое значение, — например, изменение концентрации или состава иммуноглобулинов, белков комплемента, иммунных комплексов, белков острой фазы, сердечного миозина, альфа-фетопротеина и основного белка миелина при патологии нервных клеток, канцероэмбрионального антигена (КЭА) и т. д. [c.16] Гормоны эндокринопатии, менструальный цикл, беременность н т. д. Специфические антитела инфекции, иммунный статус, аутоиммунные заболевания, образование антител в ответ иа аллергены и т. д. [c.16] Медиаторы клеточной активности интерфероны, интерлейкины, ростовые и хемотаксические факторы и т. д. [c.16] Вернуться к основной статье