ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Функциональные свойства клеточных рецепторов из "Биохимия мембран Рецепторы клеточных мембран" Однако, если после присоединения к рецепторам инсулина повысить температуру до 37°С и различное время инкубировать клетки при этой температуре, количество инсулина, состригаемое трипсином, постепенно снижается вплоть до полного исчезновения. Вместе с тем обработанные трипсином клетки содержат радиоактивную метку. Поскольку инсулин соединен с рецептором ковалентной связью, его поступление внутрь клетки может произойти только вместе с рецептором. Описанный выше эксперимент в различных модификациях использовали для оценки интернализации разных по специфичности клеточных рецепторов. [c.22] Переходя ко второму из поставленных выше вопросов, а именно судьбе интернализованных рецепторов, следует прежде всего остановиться на свойстве рецепторов, уже попавших внутрь клетки, вновь перемещаться на ее поверхность. Это явление названо рециклированием рецепторов. Ниже описан один из демонстративных экспериментов, доказывающих существование указанного процесса. [c.24] Существенно, что присутствие лиганда не влияет на течение событий при интернализации рецепторов. Как уже упоминалось, даже в отсутствие лиганда происходит спонтанная интернализация рецепторов и последующее их возвращение иа клеточную поверхность, т. е. рециркуляция рецепторов. Вместе с тем роль лигандов велика в синхронизации процесса интернализации рецепторов. Лиганды осуществляют сортировку клеточных рецепторов, обеспечивая избирательную рециркуляцию одних при сохранении на клеточной поверхности большинства других (Н. J. Geuze et al., 1984). Все сказанное иллюстрирует схема, представленная на рис. 6. [c.25] В отличие от лигандов в мономерной форме димеры тех же лигандов ти их более крупные агрегаты способны сшить между собой на клеточной поверхности несколько рецепторов одинаковой специфичности. Это приводит к формированию агрегатов рецепторов. Последние постепенно укрупняются, перемещаясь в плоскости мембраны к одному из полюсов клетки. Здесь собираются все агрегаты из рецепторов данной специфичности, образуя структуру наподобие шапочки (кэп — от англ. ap). Последующие события связаны с интернализацией агрегатов и (или) сбрасыванием их во внешнюю среду. При этом, судя по данным электронной микроскопии, вместе с агрегатами рецепторов во внешнюю среду попадает и часть клеточной мембраны (С. Быковская и др., 1985). [c.25] Описанное явление впервые установлено при изучении анти-генсвязывающих рецепторов лимфоцитов иммуноглобулиновых рецепторов В-лимфоцитов. Агрегацию иммуноглобулиновых рецепторов можно осуществлять с помощью антител против иммуноглобулинов (их бивалентных F(ab )2-фрагментов). Утрата иммуноглобулиновых рецепторов в описанных условиях носит обратимый характер при использовании в экспериментах высокодифференцированных лимфоцитов от взрослых животных. Если продолжить инкубацию клеток при 37°С, на клеточной поверхности вновь появятся рецепторы указанного типа за счет биосинтеза рецепторных иммуноглобулинов. [c.25] Сделанное выше заключение подтверждается данными, свидетельствующими о возможности имитации действия гормона бивалентными антителами, взанмоденствующимн непосредственно с рецептором. Так, инсулиноподобный эффект вызывают только бивалентные фрагменты антител против рецептора этого гормона, но не моновалентные РаЬ-фрагменты. [c.26] Таким образом, следует разграничивать два сходных, по отличающихся по своим последствиям процесса интернализацию рецепторов, протекающую спонтанно или под действием моновалентного лиганда, и интернализацию рецепторов в агрегированной форме. В последнем случае процесс интернализации связан, по крайней мере, с органиченным расщеплением рецепторов и проявлением биологического действия лиганда, опосредуемого рецептором. Это позволяет предположить, что продукты ограниченного распада рецепторов могут обладать сигнальными функциями, оказывая в каждом случае строго определенное влияние на клеточный метаболизм. Функция собственно лиганда сводится к тому, чтобы обеспечить конформационные изменения в молекуле рецептора и избирательный эндоцитоз рецепторов данной специфичности. [c.27] Вернуться к основной статье