ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Принципы записи кривых индукции флуоресценции хлорофилла из "Информационные возможности метода индукции флуоресценции хлорофилла" Однолучевой флуорометр. Разница между спектрами флуоресценции и поглощения хлорофилла позволяет возбуждать флуоресценцию светом одной длиной волны (синий свет), а измерять ее в другом диапазоне (в красной области спектра). Эта особенность использована при создании однолучевых флуорометров, в которых один источник света служит как для возбуждения флуоресценции, так и для индукции фотосинтеза. Простейшая схема прибора данного типа дана на рис. 1.3. Применение сине-зеленого светофильтра позволяет предотвратить попадание на объект излучения с длиной волны более 600 нм. Красный светофильтр (или монохроматор) отделяет флуоресценцию от отраженного света. Схема может быть дополнена конденсорными линзами, нейтральными светофильтрами (для регуляции интенсивности освещения объекта), фотозатвором и кюветой с 2% раствором СиЗО , расположенной после источника света и служащей для поглощения теплового излучения. [c.15] Информационные возможности метода индукции флуоресценции... [c.17] Различают быструю фазу индукции флуоресценции хлорофилла, включающую в себя переход от уровня (когда все реакционные центры ФСП открыты ) до максимума Р, и медленную фазу (снижение флуоресценции после пика Р до ква-зистационарного уровня F. ). Интерпретация индукционных переходов флуоресценции хлорофилла приведена в разделе 1.4. [c.17] Модулирующий флуорометр. Название данного типа приборов связано с применением так называемого принципа импульсного модулирования, когда в качестве измеряющего излучения используют импульсный свет низкой интенсивности. Возникающая в результате вспышки измеряющего света разница в сигнале флуоресценции усиливается специальным селективным усилителем. Современный модулирующий флуорометр имеет 4 источника света, обеспечивающих 4 типа освещения объекта. [c.17] ПЛОТНОСТЬ потока фотонов за время импульса — 0,2-1 мкмоль фотонов м с , длительность имульсов —1-3 мкс, частота — от 1,6 до 600 кГц в зависимости от режима записи и типа прибора). [c.18] При записи индукционных кривых соблюдают следующий порядок включения-выключения вышеперечисленных источников света. Включают источник измеряющего света (ML), в результате чего флуоресценция достигает значения (рис. 1.5). Интенсивность ML настолько мала, что РЦ ФСП остаются при этом открытыми . Затем применяют короткую вспышку света высокой интенсивности, который восстанавливает Од всех комплексов ФСП. Флуоресценция достигает максимального значения F (РЦ ФСП - закрыты ). По разнице между уровнями флуоресценции F и F оценивают потенциальную эффективность фотохимии ФСП в адаптированном к темноте состоянии (см. гл. 2). [c.18] После того как флуоресценция релаксирует до уровня F (за счет оттока электронов от Од к пулу пластохинонов), включают актиничный свет (AL), который вызывает изменения выхода флуоресценции, аналогичные описанным выше для однолучевых установок (шкала времени на рис. 1.5 не позволяет увидеть быструю фазу индукционной кривой). Интенсивность флуоресценции в определенный момент времени в ходе индукции фотосинтеза обозначают F. Снижение уровня сигнала (тушение флуоресценции) вызвано окислением Од в результате активации реакций темновой фазы фотосинтеза фотохимическое тушение флуоресценции) и увеличением тепловой диссипации в светособирающей антенне ФСП нефотохимическое тушение флуоресценции). [c.18] Информационные возможности метода индукции флуоресценции... [c.19] Информационные возможности метода индукции флуоресценции... [c.21] Поскольку при переходе из состояния 1 в состояние 3 чувствительность регистрирующей части уменьшается во столько же раз, во сколько увеличивается интенсивность света, освещающего объект, разница в величине сигнала возникает только за счет увеличения квантового выхода флуоресценции при восстановлении Од. На рис. 1.8 показана индукционная кривая, полученная в результате использования данного технического приёма для измерения величины параметра Р (Р ,ах)- проверки правильности работы устройства данного типа полезно убедиться в следующем. [c.21] Информационные возможности метода индукции флуоресценции... [c.23] Пример применения метода насыщающих вспышек на однолучевом флуорометре. Быстрая фаза индукции флуоресценции листа картофеля записана в двух временных интервалах 0-22 мс с шагом 0,11 мс и 0,022-1,22 с с шагом 2,75 мс. [c.23] Вернуться к основной статье