ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Электрофорез в колонках с гранулированной поддерживающей средой из "Электрофорез в разделении биологических макромолекул" Эта методика была предложена в начале 50-х годов, а разработанный для нее прибор подвергся с тех пор многим усовершенствованиям и модификациям. Согласно этой методике, электрофоретическое разделение проводят в колонке с гранулированной поддерживающей средой, а полученные зоны элюируют по окончании или в процессе электрофореза в коллектор фракций. [c.50] В качестве примера рассмотрим устройство, предложенное Поратом [1021] (рис. 17). Оно представляет собой перевернутую и-образную систему трубок, соединяющую между собой два электродных сосуда. Одно колено системы состоит из электрофоретической колонки, окруженной охлаждающей рубашкой, другое — заполняется буфером и служит для обеспечения электрического контакта с колонкой, к нижнему концу которой может присоединяться воронка для собирания фракций. Внутрь колонки помещают вырезанную из листа пористой пластмассы втулку, имеющую вид маленькой чашечки с двойным дном. Два колена с жидкостью связаны друг с другом при помощи шлифа. В верхнюю часть колонки также вставляется шлиф с краном, через который подается буфер для ее промывания или элюции разделенных фракций. В стенке внутреннего шлифа оделано отверстие, а к наружному припаян штуцер таким образом, что при соответствующем повороте шлифа жидкость может проходить в боковой рукав. В колонке такой конструкции размером 55X2 см, заполненной сефадексом или целлюлозой в качестве поддерживающего материала, можно проводить электрофорез при напряжении 500—1000 В и силе тока 25—50 мА. [c.51] Промышленность выпускает несколько типов приборов для крупномасштабного колоночного препаративного электрофореза. Примером может служить колонка Пората фирмы LKB. Трубка в ней снабжена внутренним и внешним холодильниками. В ходе электрофореза сместившиеся ко дну колонки фракции можно извлекать, прокачивая буфер через специальные выводы. Этот метод был применен, в частности, для выделения транофер рина из сыворотки крови человека [405]. [c.52] Вернуться к основной статье