ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Определение пептидов по методу Фолина — Лоури из "Твердофазный синтез пептидов" Цветная реакция Фолина—Лоури очень удобна для обнаружения пептидов. Она наиболее чувствительна в случае длинноцеиочечных пептидов, содержащих фенольные группы, однако с ее помощью можно определять и простые пептиды неароматического характера. В отличие от нингидринной реакции реакция Фолина — Лоури не требует нагревания и ее проведению не мешает присутствие аммиака. Пиридин и коллидин затрудняют проведение реакции, поэтому указанные соединения должны быть удалены из образца путем его высушивания. Значение pH образца должно быть близко к нейтральному. Кривая зависимости интенсивности окраски от концентрации не линейна, поэтому для точного измерения концентрации необходимо строить стандартную калибровочную кривую (см. табл. 5). [c.131] Реактивы. 1. Карбонат натрия, 2%-ный раствор в 0,1 и. едком натре. [c.131] Методика. К 0,05—0,2 мл образца добавляют Злл реактива 4 и смесь выдерживают в течение 10 мин. На такое же время оставляют контрольный раствор с реактивом. Затем добавляют при встряхивании 0,3 мл реактива 5 и через 30 мин измеряют поглощение при 700 нм. Величину поглощения контрольного раствора вычитают. Можно изменять используемые объемы, но так, чтобы соотношение реактивов 4 и 5 составляло 10 1. Если объем образца слишком велик, то общий объем реакционной смеси можно уменьшить, приготавливая вдвое более концентрированный раствор реактива 4 и беря его в количестве 1,5 мл на 0,3 мл реактива 5 можно также уменьшить объемы стандартных реактивов 4 и 5 до 1,0 и 0,1 лгл соответственно. [c.132] Вернуться к основной статье