ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Ступенчатый синтез олигодезоксирибонуклеотидов и полидезоксирибонуклеотидов из "Химия биологически активных природных соединений" Синтетические исследования внесли значительный вклад в вопросы уточнения структуры нуклеиновых кислот. Удалось синтезировать олиго-и полинуклеотиды с определенной нуклеотидной последовательностью, которые были идентифицированы с природными соединениями, выделенными при распаде нуклеиновых кислот. [c.391] Синтетические олиго- и полинуклеотиды представляют интерес также для проведения различных биохимических исследований, позволяющих уточнить биолох ическую роль нуклеиновых кислот (о ферментатиьаом синтезе нуклеиновых кислот см. стр. 441). [c.392] Конденсация нуклеозидного и нуклеотидного компонентов в присутствии хлорангидридов ароматических сульфокислот дает хорошие выходы динуклеозидфосфатов, и в последнее время эти хлорангидриды все чаш е используют в синтезе олиго- и полинуклеотидов. [c.393] Однако по различным причинам данные реагенты не нашли широкого практического применения, и до сих пор наиболее эффективными активирующими средствами при построении межнуклеотидных связей служат дициклогексилкарбодиимид и хлорангидриды ароматических сульфокислот. [c.393] Большинство исследователей отдает предпочтение пути А вследствие достижения более высокого выхода, а также большей стабильности и доступности дезоксирибонуклеозид-5 -фосфатов по сравнению с З -фос-фатами. [c.394] Для получения олигодезоксирибонуклеотидов используют также синтез на полимерной основе , разработанный в химии пептидов. Сущность его состоит в том, что нуклеозид связывают ковалентно с нерастворимым полимером и последовательно наращивают олигонуклеотидную цепь с З -конца. В заключение проводят расщепление ковалентной связи олигонуклеотида с полимером и последующее элюирование олигонуклеотида. Несомненным преимуществом данного метода является легкость очистки и выделения промежуточных и конечных соединений, что позволяет существенно увеличить выходы олигонуклеотидов. [c.395] Синтез на полимерной основе в настоящее время ограничен областью ди- и тринуклеотидов, но, вероятно, он найдет применение для получения и более высокомолекулярных олигонуклеотидов. [c.397] Защищенные олигодезоксирибонуклеотиды, в частности динуклеотиды, содержащие свободные фосфатные остатки у С5 или Сз-, являются исходными соединениями при получении полинуклеотидов путем ступенчатого наращивания цепи или реакцией полимеризации. В связи с этим интересно рассмотреть методы их синтеза. [c.397] Каждая ступень включает конденсацию олигонуклеотида с мононуклеотидом в присутствии дициклогексилкарбодиимида или мезитиленсульфохлорида и последующую щелочную обработку для удаления ацетильной группы. [c.400] Путь синиеза полидезоксирибонуклеотидов, основанный на последовательной конденсации защищенных олигонуклеотидных блоков, более привлекателен. Но с увеличением длины цепи олигонуклеотидных компонентов, вводимых в конденсацию, возрастают трудности создания межнуклеотидной связи и соответственно уменьшаются выходы. [c.401] При этом выходы олигонуклеотидов не превышали 15%. [c.401] Синтез блочным методом полидезоксирибонуклеотидов, содержащих двадцать мононуклеотидных единиц, иллюстрирует возможности этого метода и является значительным достижением в области химического синтеза полинуклеотидов. [c.403] Достоинствами предложенного метода являются легкость очистки высокомолекулярных продуктов реакции от более низкомолекулярных реагентов и высокие выходы на каждой стадии, сокращение числа стадий. Кроме того, присутствие в каждом фрагменте 5 -фосфомоноэфирной группы открывает возможность наращивания цепи в двух направлениях. [c.404] Вернуться к основной статье