ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Определение сырого протеина из "Основы биологической химии и зоотехнический анализ" Аммиак поглощается 0,1 и. серной кислотой. Избыток ее титруют 0,1 и. раствором едкого натра или кали. По количеству связанной Н9504 определяют содержание азота, бывшего в навеске корма 1 мл 0,1 и. серной кислоты соответствует 0,0014 г азота. [c.261] Протеин, определяемый с помощью метода Кьельдаля, называется сырым потому, что устанавливают содержание не только белкового азота, но и азота аминокислот и их амидов, азота гликозидов, алкалоидов и солей азотной и азотистой кислот. [c.261] В колбу Кьельдаля наливают осторожно по стенке 10 мл концентрированной серной кислоты. Происходит обугливание вещества. Для ускорения реакции в колбу добавляют какой-нибудь катализатор и 3—5 г сернокислого калия (для повышения точки кипения смеси). В качестве катализаторов применяют сернокислую медь (0,5—1 г), пергидроль (2—3 мл) и др. [c.262] Колбу с навеской и кислотой закрывают колпачком и помещают на специальный штатив для сжигания (рис. 19). Во время сжигания следует часто перемешивать содержимое колбы, чтобы на стенках ее не оставалось несгоревших частиц. Когда стенки колбы очистятся, а жидкость будет спокойно кипеть на дне, можно прекратить помешивание и усилить нагревание. Окончание сжигания определяют по цвету жидкости — она становится прозрачной, бесцветной или зеленовато-голубоватой. На дне колбы имеется хорошо растворимый в дистиллированной воде осадок. [c.262] При сжигании кормов с большим содержанием жира в начале разложения жидкость может сильно вспениваться и уходить из колбы. Чтобы этого не произошло, следует добавить в колбу 1 мл этилового спирта (96%-но-го) для изменения поверхностного натяжения жидкости. [c.262] По окончании сжигания в охлажденную колбу приливают около 50 мл дистиллированной воды, размешивают содержимое и переливают в колбу для отгона аммиака. [c.262] в которой производилось сжигание, несколько раз ополаскивают небольшими порциями дистиллированной воды и приливают ее к основному раствору в отгонной колбе. [c.262] Примечание. Если используется прибор для микроотгона аммиака, то содержимое колбы, в которой проводилось сжигание, переносят (после добавления воды) в мерную колбу на 100 мл. Доводят уровень жидкости до метки и размешивают. В отгонную колбу прибора берут 50 мл раствора. Другую его половину используют для повторного определения. [c.262] Отгон аммиака считают законченным, если лакмусовая бумажка не синеет при нанесении на нее кайли из трубки холодильника. [c.263] Титрование показывает, сколько серной кислоты осталось свободной (1 мл 0,1 и. щелочи нейтрализует 1 мл 0,1 н. кислоты). По разности между количеством кислоты, взятой в приемнике и оставшейся свободной, определяют, сколько H2SO4 связалось с аммиаком. [c.264] Для определения сырого протеина в воздушносухом корме полученный процент азота умножают на 6,25. Содержание протеина (в %) при первоначальной влажности и в сухом веществе корма находят по формулам, приведенным в методиках определения кальция и фосфора. [c.265] Реактивы и оборудование концентрированная серная кислота, уд. вес 1,84—1,82 0,1 н. растворы серной кислоты и едкого натра катализаторы (сернокислая медь и сернокислый калнй) 33—40%-ный раствор едкой щелочи порошкообразная пемза, стеклянные или фарфоровые трубочки лакмусовая бумага (красная) 1%-ный раствор индикатора (метилоранж или конгорот) аналитические весы пробирка для взятия навески кормов капельница для индикатора установка для титрованных растворов штатив для сжигания по Кьель-далю аппарат для отгонки аммиака промывалка колбы Кьельдаля для сжигания емкостью 50—250 мл колбы Кьельдаля для отгона аммиака. [c.265] Шкалу образцовых растворов, приготовленную из 1,1815 г X. ч. (NH4)2S04, окрашивают теми же реактивами и колориметрируют заранее. [c.266] Показатели шкалы откладывают на графике. [c.266] Содержание сырого протеина в исследуемом веществе определяют умножением процента азота на 6,25. [c.266] Реактивы и оборудование концентрированная серная кислота (уд. вес 1,84) USO4 3%-ный раствор щелочи (КОН) 50%-ный раствор сегнетовой соли реактив Несслера аналитические весы пробирки для взятия навески колбы Кьельдаля (на 150—250 мл) для сжигания навески колпачки на колбы, мерные колбы на 100 мл, пипетки, фотоэлектроколориметр. [c.266] Реактив Несслера 2,5 г йодистого калия растворяют в 3 мл воды, прибавляют 3,5 г двуйодистой ртути и растирают в фарфоровой ступке до полного растворения. Прибавляют 87 мл 15%-ного раствора КОН, смесь перемешивают и помещают в склянку из темного стекла. Раствор используют для колориметрирования через 2—3 дня после приготовления (возможно применение продажного реактива Несслера). [c.266] Вернуться к основной статье