ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Аминокислоты из "Химия белка" Методы, основанные на анализе составных частей молекул белка, включают определение элементов азота и углерода, некоторых аминокислот, например тирозина, биуретовой и фор1-мольной группировок. Отдельные белки могут быть иногда определены по специальным группам, например по железу в гемоглобине [2, 3] или иоду в тиро-глобулине. Все эти методы требуют, чтобы определяемая составная часть находилась в испытуемом образце исключительно в белковой части. Поэтому белок должен быть отделен от всех других органических веществ и карбонатов, если он определяется по углеродному составу, и от всех других азотсодержащих составных частей, если основой анализа является метод Кьельдаля. Обычная практика анализа кормов и овощей на белки на основании определения общего азота в этом отношении всегда внушает сомнения. Наличие алкалоидов, аминокислот или других азотсодержащих веществ в таких веществах достаточно вероятно, хотя, как правило, их количества малы по сравнению с содержанием белка. Вследствие изменчивости свойств различных белков нет общих методов их выделения из сложных смесей. В хорошо изученных системах могут применяться специальные методы выделения. [c.15] Тот факт, что белок редко определяют по содержащемуся в нем углероду, не означает еще, что этот метод непригоден. Наоборот, он имеет некоторые преимущества перед другими методами, если только препарат допускает полное отделение белка от всех других источников углерода. За исключением небольшого числа методов, а именно метода Ван-Сляйка, Пейджа и Кирка [10], точное определение углерода довольно сложно, чем, вероятно, отчасти и можно объяснить, почему его редко используют при анализе белков. [c.16] Из рассмотрения указанных источников ошибок при кьельдалевском разложении сразу видно, что почти все исследователи учитывали часть источников расхождений, не рассматривая их все одновременно. Поэтому результаты различных исследований нельзя суммировать они могут быть противоречащими один другому, так как некоторые факты не учитывались. Помимо других форм азота, не встречающихся в белковой молекуле, наиболее важными факторами являются катализатор, время нагревания и применение дополнительных восстанавливающих или гидролизующих веществ. Из второстепенных факторов надо учитывать гигроскопичность белковых образцов, которая мешает точному взвешиванию сухого образца белка, что отмечалось рядом авторов [11]. [c.20] Прямое определение по Несслеру продуктов разложения, полученных по Кьельдалю, пожалуй, применяется более широко, чем метод обычной перегонки [89—93]. Образующаяся окраска измеряется при помощи разнообразных фотометров и колориметров. Эта методика экономит некоторое время, и она также более целесообразна для клинических целей, вследствие широкого применения колориметров при клинических анализах. Метод является менее точным, чем перегонка, но не исключено, что вводимые ошибки не больше, чем ошибки, присущие другим этапам аналитического метода. Образование аминов [61, 76] при разложении, несомненно, вводит ошибки при работе по этому методу. Шере [94] произвел сравнительное изучение методов перегонки и Несслера и пришел к выводу, что последний достаточно точен для клинических целей. Интересное изменение, которое устраняет большую часть критики метода Несслера, состоит в применении гипобромита для окисления аммиака в субстрате [95, 96]. Избыток гипобромита определяется иодометрически. Применение фосфорномолибденовой кислоты [96] при разложении, повидимому, нежелательно [15]. [c.24] Вернуться к основной статье