ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Адсорбция и элюирование. Хроматография из "Белки Том 1" В последующие годы продолжалось применение адсорбционных методов для получения различных белков и были разработаны новые методы. Часто оказывается возможным найти адсорбент, который довольно селективно адсорбирует один из компонентов смеси, вследствие чего происходят выделение и одновременное концентрирование этого компонента. Несмотря на то что общие законы адсорбции хорошо изучены, подбор адсорбента, пригодного для выделения данного конкретного белка, является, повидимому, в значительной степени эмпирическим. Кэссиди [337], Дитц [338] и Наход [339] составили обширные таблицы материалов, применяющихся в качестве адсорбентов. Повидимому, вещества с наиболее сильными адсорбционными свойствами (насколько можно судить по адсорбции на них газов и простых органических соединений) будут обладать слишком большой адсорбционной способностью, но недостаточной селективностью по отношению к белкам. Систематические исследования по адсорбции чистых белков на различных веществах, повидимому, отсутствуют. [c.74] Гель фосфата кальция, приготовленный по методу Кейлина и Хартри [345] или по методу Кунитца [264], является ценным адсорбентом для многих белков [346, 347]. Одним из преимуществ этого материала является то, что при понижении рН он растворяется, поэтому при селективной адсорбции выделяемого белка на этом адсорбенте отпадает необходимость в подборе соответствующего элюирующего агента. Лактикодегидраза была адсорбирована из экстракта сердечной мышцы на геле фосфата кальция, элюирована буферным раствором, очищена осаждением вначале ацетоном, а затем раствором сернокислого аммония и, наконец, выделена из раствора последнего в кристаллическом состоянии [346]. Были применены и другие неорганические вещества, например гели гидроокисей и сульфиды металлов [348, 349]. Протромбин адсорбировали на гидроокиси магния и выделяли при разложении последней действием ССЬ [231]. [c.75] Иногда применяли органические адсорбенты, например бензойную кислоту [350, 351], хинин и крахмал. Подобно фосфату кальция, бензойная кислота может растворяться (в эфире или при изменении раствора рН), что упрощает операцию. Было показано, что многие, но не все, образцы продажного маисового крахмала адсорбируют амилазу [352, 353] причины такого различия в поведении разных препаратов крахмала не выяснены. Вследствие этого оказалось невозможным проверить правильность заманчивого предположения о том, что в данном случае адсорбция обусловлена теми же силами, которые вызывают взаимное притяжение фермента и его субстрата. Дальнейшее расширение подобных исследований было бы в высшей степени желательным. Для разделения белков, обладающих специфическим сродством , особенно подходящими могут оказаться нерастворимые полимеры известного состава. [c.75] Адсорбция на жидкостях не нашла широкого применения, вероятно, вследствие возможности денатурации на поверхности раздела жидкость—жидкость. Следует, однако, отметить, что ксантиноксидаза молока концентрируется в слое сливок [360]. [c.76] Вернуться к основной статье