ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Кинетика из "Катализ в химии и энзимологии" НЫЙ пример кинетического поведения субстрата в стационарных условиях, которое можно непосредственно интерпретировать в рамках определенного механизма, это кинетические закономерности, выран аемые в виде параллельных прямых в координатной системе обратных величин скорости реакции и концентрации субстрата (1/у — l/[Slo). Закономерности этого типа позволяют предположить, что суммарная реакция включает две стадии с образованием какого-либо промежуточного комплекса или соединения фермента с субстратной группой, участвуюш ей в реакции переноса [ пинг-понг -механизм, схема (12)] [14]. [c.54] Кинетика такой реакции описывается уравнением (13). Это уравнение не содержит члена с произведением концентраций типа К/[АВ1[Х], который обычно входит в выражение для скорости реакции при наличии тройного комплекса или в случае других механизмов. Именно этот член и обусловливает пересечение прямых в координатной системе двойных обратных величин. Однако данный механизм кинетически нельзя доказать однозначно, поскольку отдельные кинетические константы реакции, например те, которые входят в член с произведением концентраций, могут быть слишком небольшими, чтобы этот член можно было обнаружить экспериментально. Следовательно, аналогичное кинетическое поведение может имитировать также и механизм с участием тройного комплекса, в котором первая стадия является медленной и по существу необратимой [14, 15 . Тем не менее наблюдение пинг-понг -кинетики приносит, по-видимому, наибольшую информацию из всех кинетических результатов, полученных при изучении ферментативных реакций в стационарных условиях. Дело в том, что на основании наблюдаемых кинетических закономерностей можно предположить определенный химический механизм, который затем можно проверить экспериментально. [c.54] Механизмы (12) и (14) являются, несомненно, упрощенными для реакций подобного рода, поскольку они не учитывают возможного связывания ферментом уходящей молекулы А и акцептора X тот факт, что фермент обнаруживает некоторую специфичность по отношению к этим молекулам, указывает, что такие центры связывания должны, безусловно, существовать. Уточненный механизм, включающий взаимодействие с центрами связывания, представлен в виде схемы (15). [c.55] Кинетические закономерности, которые следуют из уравнения (15), являются такими же, как и в случае более простых урванений (12) и (14), хотя детальная интерпретация кажущихся кинетических констант является несколько другой. Однако существование центров связывания приводит к тому, что молекула акцептора X может связываться свободным ферментом и влиять таким образом на связывание им молекулы А — В, что приводит к своеобразному ингибированию субстратом. Для данного класса реакций такое поведение является обычным и приводит к отклонениям от параллельности прямых в координатах обратных величин при высоких концентрациях субстрата. [c.55] Вернуться к основной статье