ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Седиментационное равновесие и приближение к нему из "Структура макромолекул в растворах" Полный -средний вес может быть найден последующим усреднением Mq x ПО X [14, 76]. [c.486] Остановимся несколько подробнее на физическом смысле приближения ф(/) О [см. формулу (6.94)]. Предложенный метод расчета, в сущности, основан на двух приближениях, первое из которых требует достаточно больших времен t, чтобы можно было отбросить ф( ), а второе — не слишком больших t, чтобы можно было работать в узком слое раствора за пределами -плато. Поэтому существует оптимальное время, порядка 2—6 ч (в зависимости от со), при котором погрешности в определении Mq минимальны. [c.486] Вместе с тем может возникнуть ощибка, обусловленная достаточно интенсивной седиментацией (которая в явном виде учитывается в формулах Фюрта). При слишком больших со или t можно потерять часть тяжелых компонентов, которые просто необратимо осядут на дно. Тогда при разных ш могут получиться разные или М , а при постоянных со они могут меняться с течением времени. [c.487] Поэтому, чтобы сделать метод самоконтролируемым [как пересчет giv(x)необходимо тщательно следить за изменением непосредственно изме- ряемых величин (М или М ) с течением времени. Практи- 2ffff чески или удобно определять следующим образом. [c.487] Ультрацентрифугируемый раствор наливается поверх тонкого (1 мм) слоя несмешиваю-щейся с ним более тяжелой жидкости (вода для растворов в предельных углеводородах, хлороформ или I4 для водных растворов и т. д.). При 0 этом с большой точностью удается зарегистрировать Хь. [c.487] Опыты проводились В гептановых растворах при Со = = 2,5 мг1мл и скорости вращения 30 ООО об1мин, с водным искусственным дном. Концентрационные эффекты в этой системе не наблюдались. В принципе они всегда могут быть учтены экстраполяцией по формуле (6.89). При систематическом росте Му, у дна и уменьшении у мениска (то же относится и к М следует экстраполировать соответствующие величины к = О [8]. [c.489] Как следует из формулы (6.103), метод позволяет найти весь набор Мд, однако точность их определения будет убывать с д, так как только Му, и М , определяются непосредственно из се-диментационных диаграмм, а остальные находятся с помощью графического интегрирования или дифференцирования с по X, с неизбежным накоплением погрешностей. [c.489] Если поместить в кювету ультрацентрифуги смесь низкомолекулярных жидкостей различной плотности и создать сильное центробежное поле, сравнительно быстро устанавливается седиментационное равновесие, в результате которого в радиальном направлении возникает постоянный во времени градиент плотности. Если в таком смешанном растворителе содержался высокомолекулярный компонент с плотностью, промежуточной по сравнению с плотностями растворителя, то постепенно он должен собраться в одну полосу — так называемую изоденсу,— где его плотность совпадает с локальной плотностью растворителя. Эта полоса будет несколько размазана вследствие диффузии, причем тем больше, чем ниже молекулярный вес компонента. Статистический анализ распределения концентрации в этой полосе дает возможность определить М, тогда как из положения максимума полосы находится V. [c.489] Этот экспериментальный принцип был впервые применен Месельсоном с сотрудниками [81] при исследованиях генетической ДНК различного происхождения. Градиент плотности в этих работах создавался хлоридом цезия. Месельсон таким образом получил целый спектр плотностей ДНК это показало, что метод может быть применен для прямого исследования непрерывного распределения плотности, в частности для анализа полидисперсности состава (композиционной неоднородности, ср. 10 гл. IV) сополимеров. [c.489] Индексы 1 (см. ниже) и 2 соответствуют легкому и тяжелому компонентам растворителя, — коэффициент активности, р — локальная плотность растворителя на расстоянии х от оси вращения. [c.490] Легко убедиться, что М всегда больше Мп и соответственно сольватация всегда приводит к сужению изоденсы. [c.492] Вернуться к основной статье