ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Пластиякн для хроматографирования. Нанесение пробы и проявление хроматограммы Комплект оборудования для тонкослойной хроматографии Адсорбенты для хроматографии из "Техника лабораторных работ " Тонкослойная хроматография является одним из видов распределительной жидкостной хроматографии. Быстрота разделения смесей, относительная простота и универсальность обеспечили быстрое распространение этого метода, а использование гранулированного сорбента дает ему преимущества перед бумажной хроматографией из-за меньшего размывания пятен в направлении разделения. [c.323] Разделение смесей производят на пластинках, покрытых тонким слоем адсорбента (силикагеля, оксида алюминия, полиамида, целлюлозы). Адсорбционный слой с пленкой растворителя, удерживаемого сорбентом, служит неподвижной фазой, а подвижной — индивидуальные растворители или смеси растворителей. [c.323] Техника хроматографирования в тонких слоях состоит в подготовке пластинок, нанесении пробы, проявлении хроматограммы и детектировании пятен. Положение пятна разделенного вещества описывается, так же как и в бумажной хроматографии, посредством измерения величины R , т. е. путем сопоставления с стандартных веществ вещества идентифицируются способом свидетелей . [c.323] Тонкослойная хроматография применяется для идентификации веществ, определения чистоты вещества, качественного и количественного анализа веществ и их смесей, а в последнее время и для препаративных целей. [c.323] Существуют две модификации тонкослойной хроматографии с закрепленным и с незакрепленным слоем адсорбента. [c.323] Тонкий слой адсорбента распределяют на подложке — пластинке из стекла, алюминиевой фольги или пластмассы. Чаще всего используют стеклянные пластинки (их легко очищать и можно использовать многократно) толщиной 2—4 мм, размером 3X8, 2,5 X 7,5 5 X 15 10 X 20 20 X 20 см. [c.323] Пластинки промывают проточной водой, погружают на 24 ч в сосуд с 1 % раствором моющего вещества, после чего тщательно промывают дистиллированной водой и высушивают, предохраняя от пыли. Брать пластинки следует за ребра, не касаясь поверхности. Хранить пластинки можно в эксикаторах или полиэтиленовых мешочках. Использованные пластинки для повторного применения сначала очищают от слоя адсорбента, после чего их промывают и высушивают, как указано выше. [c.323] В случае применения гипса смесь из 5 г адсорбента (силикагеля или оксида алюминия), 0,2 г гипса и 12 мл воды растирают в фарфоровой ступке до однородной консистенции. Полученную массу наносят на подготовленную стеклянную пластинку и разравнивают при помощи специального устройства, обеспечивающего толщину слоя 0,15—0,25 мм по всей поверхности. В случае применения крахмала 28,5 г тонкоизмельченного и просеянного через сито 0085 силикагеля, 1,5 г растворимого рисового крахмала и 54 мл дистиллированной воды нагревают при перемешивании до тех пор, пока раствор не начнет загустевать. Затем при постоянном перемешивании смесь охлаждают, размешивают с 20 мл дистиллированной воды и равномерно наносят на пластинки. [c.324] Пластинку с закрепленным слоем высушивают на воздухе в горизонтальном положении, после чего уже в вертикальном положении активируют нагреванием в течение 30 мин в сушильном шкафу при 110°С и хранят в эксикаторе над СаСЬ или Mg( 104)2. В процессе сушки необходимо оберегать пластинки от загрязнения пылью или от поглощения паров летучих соединений, которые могут находиться в воздухе. [c.324] При нанесении тонкого слоя адсорбента на предметные стекла рекомендуется поступать следующим образом. Готовят суспензию из 44 г АЬОз и 1,6 г гипса в смеси 70 мл хлороформа и 30 мл метилового спирта или же из 30 г силикагеля и 1,5 г гипса в смеси 50 мл хлороформа и 50 мл метилового спирта. Суспензию тщательно перемешивают встряхиванием. Затем два предметных стекла, сложенных плоскостями, погружают в нее, медленно вынимают и дают стечь жидкости. После этого стекла разделяют, высушивают и хранят в эксикаторе над СаСЬ- Если в поверхностном слое адсорбента появились трещины, пластинки непригодны к работе. [c.324] Очень удобны готовые пластинки Силуфол с тонким слоем АЬОз на подложке из алюминиевой фольги размером 150 X 150 мм и пластинки Сата D-0 , Сата DS-0 с тонким слоем силикагеля, размером 100 X ЮО и 200 X 200 мм, поставляемые странами СЭВ. [c.324] Пластинки с незакрепленным слоем подготавливают следующим образом. Адсорбент насыпают на стекло (лучше матовое) и разравнивают валиком, снимая при этом избыток. Валиком обычно служит стеклянная палочка диаметром 10 мм с надетыми на концы кусочками резиновой трубки. Расстояние между утолщенными концами трубки должно быть на 10—12 мм меньше ширины применяемой стеклянной пластинки. Толщину стенок трубки подбирают так, чтобы при накатывании образовался слой толщиной примерно 1 мм. Некоторые авторы рекомендуют распылять суспензию тонкоизмельченного адсорбента специальным распылителем по поверхности пластинки. [c.324] Пластинки с незакрепленным слоем приготавливают непосредственно перед употреблением. [c.324] Раствор пробы наносят микропипеткой в 10—20 мм от края пластинки в виде точек или коротких черточек. В случае незакрепленного слоя необходимо следить, чтобы конец пипетки не касался слоя адсорбента. [c.325] В одну точку на пластинке можно наносить до 1 мг раствора пробы. Затем растворителю дают испариться и пластинки переносят в камеру для проявления. Пластинки с закрепленным слоем можно проявлять в наклонном или вертикальном положении пластинки с незакрепленным слоем обычно ставят под углом 10—15°. [c.325] Камерой для проявления хроматограмм методом восходящей хроматографии может служить стеклянный сосуд с плоским дном, закрывающийся пришлифованной крышкой или стеклом. На дно камеры наливают столько растворителя, чтобы пластинка погружалась в него на 3—5 мм. Сначала помещают пластинку в слегка наклоненную камеру так, чтобы растворитель не смачивал стартовую полосу. Через 5—10 мин камеру возвращают в вертикальное положение. Для лучшего насыщения к стенке сосуда по всей высоте камеры прикрепляют смоченный растворителем лист фильтровальной бумаги, доходящий до дна сосуда. [c.325] При работе с закрепленным слоем адсорбента фронт продвижения растворителя на пластинке не должен превышать 100—150 мм. После того как фронт растворителя продвинется на 100—150 мм (на это требуется 15—90 мин), пластинку вынимают из камеры, отмечают карандашом линию фронта, высушивают и детектируют пятна, опрыскивая поверхность пластинки общими или специфическими реагентами [17]. [c.325] Разработаны также методы количественного определения веществ в хроматографических пятнах непосредственно на пластинке. Для этих целей используются денситометры или флуориметры. [c.326] Оборудование для тонкослойной хроматографии КТХ-01 отечественного производства предназначено для качественного анализа многокомпонентных смесей органических и неорганических веществ, а также для препаративного получения веществ, составляющих эти смеси. Оборудование поставляется в трех вариантах в виде полного (КТХ-01-1), среднего (КТХ-01-2) или малого (КТХ-01-3) комплектов, различающихся наличием тех или иных устройств. В комплект КТХ-01 входит оборудование для приготовления хроматографических пластин, для нанесения пробы, для проведения тонкослойной хроматографии, для детектирования пятен химическими методами и для обнаружения их в ультрафиолетовом свете. [c.326] Адсорбенты, применяемые в хроматографии, кроме большой удельной поверхности, достигающей сотен квадратных метров на грамм, должны обладать избирательностью, химической и каталитической инертностью в отношении компонентов разделяемой смеси и подвижной фазы. Используемые в хроматографии адсорбенты должны быть, по возможности, монодисперсными (с одинаковым размером частиц), и состав их должен быть стандартным, что гарантирует воспроизводимость эксперимента. [c.326] Вернуться к основной статье