ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Техника количественного анализа биологических препаратов из "Спектрохимический эммисионный анализ" В медицинской литературе можно найти описание нескольких опытов выполнения количественного спектрального анализа тканей. Мы не будем здесь останавливаться на этих опытах, но наши опыты отличаются от них в двух принципиальных пунктах 1) они производились над золой тканей или над электролитически выделенным материалом, для чего обычно приходилось пользоваться крупными частями органов или целыми органами, т. е., следовательно, самой работе предшествовал целый ряд химических манипуляций, тогда как у нас работа производилась над свежим или фиксированным материалом 2) в основу количественного определения мы клали абсолюхную интенсивность линий и прежде всего последних линий элементов, которые сравнивались с интенсивностью линий стандартных растворов. [c.29] В первом ориентированном снимке мы должны решить вопрос о том, имеется ли искомый элемент в органе, и в каком именно. Обычно уже этот снимок дает приблизительное указание относительно распределения элемента в различных тканях. Затем подлежащие анализу пробы свежего шещества или обработанного формалином, слоями в 0,2—1 г, обезвоживаются двукратным кипячением в открытых фарфоровых ча ш ах с абсолютным спиртом и выпариванием на водяной бане, после чего они способны поглотить растворы, прибавляемые для сравнения. Во время обезвоживания спирт один раз меняется. После обработки спиртом ткань может быть высушена на воздухе или при несколько более высокой температуре (при 50—60°) в сушильном шкафу или над подогреваемой пластинкой. Следует однако следить за тем, чтобы частицы органов высохли не слишком сильно, так как иначе они с трудом будут поглощать растворы, прибавляемые для сравнения. Наилучшим образом поглощаются эти растворы, когда органы имеют губчатую консистенцию. Когда кусочек ткани подготовлен, этот раствор осторожно переносится на него микроскопической пипеткой в количестве 0,1 см. Некоторые органы, например, легкие и селезенка мгновенно поглощают раствор, между тем как другие, как печень и почки, гораздо медленнее поглощают его. У последних органов частицы раствора для сравнения остаются на поверхности только во время следующего затем испарения в сушильном шкафу раствор полностью поглощается тканью. Поэтому полезно пробу органов так вырезывать, чтобы получилась плоская и более или менее значительная поверхность. Мы пользовались 1робами толщиной в 2—3 мм и площадью в 1—2 см во влажном состоянии. 1 Как только раствор поглощен органом, препарат вносится в сушильный шкаф, где он и оставляется на 10—15 минут. Затем он обрабатывается короткое время сероводородом. Здесь кстати проверяется, не стекла ли часть раствора на пластинку под препаратом. Сероводород, согласно нашему опыту, лучшее средство для образования осадков тяжелых металлов. К тому же он не вызывает никаких изменений в интенсивности линий, между тем как если взять для сравнения натриевую щелочь и перекись водорода, то интенсивность линий меняется (например, в случае анализа золота). [c.30] Кроме этого приема — прибавления для сравнения постороннего раствора в обезвоженные спиртом частицы органа — мы делали также попытки растирать кусочки ткани с несколькими каплями чистой концентрированной серной кислоты и к получавшейся черной кашице прибавлять раствор для сравнения. После краткого испарения образуется в таких случаях густая кашица, которая переносится на фильтр и подвергается действию искры. Опыты показали, что и этот прием хорош. Тем не менее, мы дальнейших опытов в этом направлении ие делали, чтобы не подвергать аппаратуру действию паров серной кислоты, образующихся во время действия искры. [c.31] Сравнения показали, что отношение интенсивностей искомых спектральных линий подлежащего определению вещества, как и вспомогательного вещества, остается одним и тем же при применении первого или второго метода предварительной обработки, если только сравнивать действительно гомологичные пары линий (см. стр. 91/92). [c.31] Электрическая установка — обычная высокочастотная установка во время действия искры материал и при количественном анализе сохраняется несколько влажным с помощью раствора азотнокислого натрия, чтобы предупредить быстрое сгорание. К концу прибавляют к обуглившимся остаткам капельку концентрированной соляной кислоты. Для количественного исследования настоятельно необходимо возможно точнее установить круг колебаний, чтобы орган сгорел возможно быстрее и, в особенности, возможно полнее. Это необходимо для того, чтобы все количество металла, содержащееся в кусочках органа, попало в искровой промежуток, В огне искры сжигаются также последние обуглившиеся остатки, почти всегда полностью или по меньшей мере до совершенно ничтожных следов. Контрольные снимки этих мельчайших следов часто обнаруживали полное отсутствие искомого вещества, а если некоторые следы его и наблюдались, то во всяком случае не в такой мере, чтобы это могю ввести в заблуждение. Далее, если в этих следах оказывалось искомое вещество, то получались и линии вещества, взятого для сравнения. При этом, как это удавалось многократно установить, отношение интенсивностей линий оказывалось таким же, как в снимке основной массы пробы (см. рис. 50). Полное сгорание ткани продолжалось от 1 до 5 минут, и одновременно с этим определялась и продолжительность освещения. [c.31] Если спектральный снимок дает неизвестное содержание элемента, лежащее между двумя количествами взятых для сравнения пластин, то интерполированное оценкой на глаз значение может быть синтезировано и затем проверено по полученному сравнительному снимку. Тем самым повышают точность анализа и одновременно увеличивают число градуированных снимков. Так удается еще различить между содержанием золота в 12 и содержанием в 14 у (см рис. 43 на стр. 91). [c.32] Остается еще обратить особое внимание на следующий пункт. Если подлежащий анализу элемент имеется в больших количествах, то почернение линий может усилиться в такой мере, что сравнение интенсивностей чрезвычайно затрудняется, и сильно ослабляется возможность устанавливать различия в концентрациях. Так как вследствие необходимости полного сгорания органа, время освещения не может быть сокращено, то для выравнивания было в несколько раз (в 2—3 раза) увеличено нормальное расстояние искры от щели в 6 — 8 см. Интенсивность линий уменьшается тогда настолько, что сравнение становится опять вполне возможным. [c.32] Уменьшение количества подлежащего анализу материала нежелательно, ибо тогда становится неточной дозировка прибавляемого сравнительного раствора. [c.32] При всех количественных анализах тканей следует иметь в виду, что распределение тяжелых металлов в органах, очевидно, довольно различное. Это подтверждает как весь наш личный опыт, так и дошедший до нас многообразный опыт других исследователей. Обнаруживается это, например, при исследовании печени на медь, легких на кремний и мн. др. Поэтому следует всегда иметь в виду это неравномерное распределение при оценке результатов количественного анализа. Играет еще определенную роль и патологическое состояние органа. Так, например, случается, при исследовании запыленных органов, что в одной части их медь оказывается в изобилии, образует целые скопления, а в других частях оказываются лишь следы меди. Естественно, что было бы совершенно неправильным при количественном определении содержания меди в куске легких, весом в каких-нибудь 0,2—0,5 г, исчислять содержание меди на 1000 г влажного или 1000 г сухого вещества. И в наших исследованиях на содержание золота в легких тоже оказалось, что распределение его было чрезвычайно неровным, так что было совершенно невозможно сказать что-либо о содержании золота во всем органе. [c.32] Вернуться к основной статье