ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Исправление спектров из "Фото-люминесценция растворов" ДЛЯ ТОГО, чтобы наблюдать его, необходимо увеличить чувствительность приблизительно в 100 раз. Но даже и в этом случае УФ-полосы сильно искажены. После пересчета на постоянную интенсивность возбуждающего света истинный спектр возбуждения (рис. 95, кружки кривой Л), удовлетворительно совпадет со спектром поглощения. [c.234] Флуоресцеин в карбонат-бикарбонатном буфере Л (сплошная линия) — спектр поглош.ения А (кружки) — исправленный спектр возбуждения — неисправленный спектр возбуждения Оштенсивность флуоресценции в зависн.мости от волнового числа, устанозлеииого на монохроматоре возбуждения при постоянной ширине ш ели). [c.234] В литературе описано много приборов для непосредственной записи спектров возбуждения флуоресценции [153—157]. В некоторых приборах используются счетчики квантов и регистрируется величина Еф/, как описано выше. В других используется термобатарея для регулирования пучка возбуждающего света и регистрируется ефД, величина, менее важная, чем еф/. В ряде приборов применяется фотоумножитель, термобатарея или другое приспособление для регулирования пучка возбуждающего света и используются электронные устройства для исправления изменений квантового выхода регулирующего устройства с длиной волны, так что регистрируется точная кривая еф/. Для химиков, желающих изготовить свой прибор, метод Паркера наиболее прост, так как с его помощью записываются исправленные спектры возбуждения с точностью 10%, что вполне приемлемо для большинства целей. Записанные спектры более точно можно исправить последующим расчетом, определив сигнал счетчика квантов методами, описанными в разделе П1,Д, 5. [c.236] Спектр испускания образца — это зависимость интенсивности люминесценции, измеренной в квантах на единичный интервал частоты (или волнового числа), от частоты или волнового числа (см. раздел I, Б,4), т. е. если Q представляет общее число квантов (всех волновых чисел), испускаемых в единицу времени, то dQld — это интенсивность при волновом числе v, а график dQldv в зависимости от v является истинным спектром испускания люминесценции. На практике спектр обычно изображают в относительных, а не в абсолютных единицах. [c.237] Различные стадии вычисления показаны на рис. 98. Так как результаты вычисления на различных стадиях выражены в от носительных единицах, то при одной длине волны все кривые нормированы к одному и тому же значению. [c.238] На рис. 54 и 100 приведены примеры кривых спектральной чувствительности в двух видах (Sv и S%). Видно, что кривая для призменного монохроматора является гладкой и непрерывной, ъ то время как на кривой для решеточного монохроматора Н еются неровности, которые обусловлены аномалиями решетки. [c.242] В ряде работ, особенно если не требуется исправлять спектры, эти аномалии не имеют значения. Их следует учитывать при исправлении спектра, они являются также существенными в приборах, предназначенных для прямой записи спектров испускания. При сравнении неисправленных спектров наличие аномалий следует иметь в виду, поскольку если их эффект налагается на широкую бесструктурную полосу испускания, то она может казаться имеющей некоторую структуру. [c.243] При использовании любого метода для исправ.тения спектров флуоресценции исправленный спектр будет являться истинным спектром испускания в том случае, если приняты меры предосторожности для предотвращения значительного поглощения флуоресценции самим раствором (см. раздел П1, 3 об эффектах внутреннего фильтра). [c.243] Коррекция спектров испускания требует много времени, особенно если спектры имеют тонкую структуру. По этой причине большинство спектров, имеющихся в литературе (включая и эту книгу), приведены неисправленными . Для большинства целей, когда необходимо качественно или количественно сравнить несколько спектров, измеренных на одном и том же приборе, эти неисправленные спектры вполне пригодны. Однако ценность спектров для других исследователей, особенно если это спектры чистых соединений, значительно возрастает, если их представить в исправленной форме. Для расчетов можно использовать вычислительную машину, как это сделано Драшеллом и сотр. [165], но лучше всего использовать прибор, который непосредственно регистрирует исправленный спектр испускания. Описано множество хметодов автоматической регистрации [153—155, 166—171]. [c.243] ИЛИ легко перестроить, когда кривая коррекции меняется в ре-зультате старения фотоумножителя или при замене фотоумножителя. [c.244] На рис. 101 показана блок-схема установки Гамильтона. Свет от источника (при желании фильтрованный) прерывался с частотой 400 Гц. Флуоресценцию образца анализировали монохроматором и фотоумножителем, и поскольку щели монохроматора не входили в систему коррекции, их при необходимости можно было менять. Сигнал фотоумножителя усиливался, умножался на функцию коррекции чувствительности и регистрировался с помощью фазочувствительного детектора, сигнал сравнения для которого подавался с комбинации фотосопротивление— лампа, установленной на прерывателе. Детектируемый сигнал подавался на самописец. [c.244] Винтовой (спиральный) потенциометр, 15 витков, 375 кОм, линейность 0,1 %, 36 ответвлений, 7,34 кОм на каждый отрезок =22 Ом, Л2 и подбираются общее сопротивление секции =220 Ом РС —печатная схема. [c.245] Гамильтон использовал решеточный спектрометр с барабаном, линейным по длинам волн, и с помощью второго многоконтактного спирального потенциометра, соединенного механически с первым, он автоматически регистрировал спектры со шкалой, линейной уже в волновых числах. Система второго потенциометра была отрегулирована так, чтобы сразу переводить длины волн в волновые числа, а выход с него подавался на ось абсцисс двухкоординатного самописца. С помощью описанных устройств можно осуществить запись спектров, линейных в длинах волн или в волновых числах, как с призменным, так и с решеточным монохроматорами. [c.245] Вернуться к основной статье