ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Некоторые трудности, возникающие при использовании метаболитов, меченных из "Метаболические пути" Использование метаболитов, меченных дало возможность проследить их судьбу в интактных организмах и, следовательно, понять физиологическую роль тех биохимических последовательностей, в которых эти метаболиты участвуют. Однако, как будет видно из последующих рассуждений, интерпретация результатов, полученных при использовании радиоактивных изотопов, сопряжена с определенными трудностями. Во-первых, как мы видели, одно и то же соединение может принимать участие сразу в нескольких метаболических процессах, а во-вторых, благодаря аллостерическим свойствам ферментов метаболиты, участвующие в одном ка-ком-нибудь процессе, могут изменять скорости реакций другого процесса. Помимо активного центра, к которому присоединяется субстрат, Б молекуле фермента может иметься другой участок, способный присоединяться к другому метаболиту, не являющемуся субстратом. Дальнейшим превращениям присоединившийся метаболит подвергаться не будет, однако в результате его присоединения может измениться конфигурация молекулы фермента, что в свою очередь может изменить скорость катализируемой реакции. Это обстоятельство нельзя упускать из виду при изучении распределения радиоактивности после добавления меченого метаболита к сложной ферментной системе. Такие трудности, возникающие при использовании радиоактивных изотопов, рассмотрим на более подробном примере изучения некоторых систем, проведенного Г. Кребсом [29]. [c.21] Подобным образом некоторые углеродные атомы могут попасть из ацетоуксусиой кислоты в глюкозу. В самом деле, углеродный скелет ацетилкофермента А, вступающего в цикл, образуется не в результате окисления изолимонной и кето-глутаровой кислот, и, наоборот, двуокись углерода образуется из той части молекулы цитрата, которая возникла в результате присоединения щавелевоуксусной кислоты. [c.23] Отсюда следует, что меченый углерод из ацетилкофермента А (или ацетоуксусиой кислоты) должен попасть в молекулу щавелевоуксусной кислоты после одного оборота цикла. С другой стороны, меченый углерод в СОг происходит из С-лактата, который предварительно превращается в щавелевоуксусную кислоту. Этот неизбежный перекрест метаболических процессов является следствием стерических особенностей молекулы цитрата, на что впервые обратил внимание А. Б. Огстон [30 . Именно в результате этого явления радиоактивный изотоп из жирной кислоты попадает в глюкозу или гликоген, хотя у млекопитающих нет системы прямого синтеза этих соединений из жирных кислот. [c.23] Этот пример показывает, как промежуточное соединение одного метаболического процесса может изменять общую скорость другого процесса, несмотря на то что в систему не добавляется никаких других метаболитов. [c.23] Эти трудности сводятся к минимуму при исследовании высших растений или грибов, у которых в результате биосинтетических процессов может происходить образование продуктов, не участвующих в дальнейшем обмене. Так, при добавлении меченого ацетата к некоторым грибам метка обнаруживается в таких конечных продуктах, как орселлиновая кислота, 6-метил-салициловая кислота, гризеофульвин или террамицин, что хорошо согласуется с гипотезой, согласно которой в некоторых случаях бензольные ядра образуются в результате конденсации остатков уксусной кислоты [32, 33]. [c.23] Вернуться к основной статье