ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Определение содержания нуклеиновых кислот в растительных тканях из "Методы биохимии и цитохимии нуклеиновых кислот растений" Для определения в тканях НК существует много способов. Все они основаны на использовании специфических реакций на рибозу, дезоксирибозу и фосфорную кислоту или на измерении специфического поглощения НК в ультрафиолетовом свете за счет азотистых оснований. Непосредственному олределению НК предшествует ряд подготовительных операций. Обычно анализ на содержание НК в тканях осуществляется в три этапа. [c.25] Второй этап—разделение НК на РНК и ДНК фрак--ционным экстрагированием или обработкой реагентами, избирательно действующими на эти НК. Например, последовательной экстракцией холодной и горячей разбавленной хлорной кислотой можно извлечь сначала РНК, затем ДНК. Разбавленные щелочи избирательно дрполимеризуют РНК и отделяют ее от ДНК анализируемого материала. При обработке материала на первом этапе анализа иногда часть веществ, мешающих определению НК, может остаться. Обычно это вещества, прочно связанные в структурах клетки. Они извлекаются вместе с НК. В этом случае необходимы дополнительцые операции по очистке НК или их дериватов. [c.25] Указанные методы, однако, имеют ряд недостатков. При работе с дифференцированными и особенно с грубыми тканями, богатыми углеводами и лигнигом, метод Шмидта и Таннгау-зера дает завышенные результаты для РНК, главным образом за счет фосфорилированных компонентов, связанных со структурами и освобождающихся при щелочной инкубации. [c.26] Метод Огура и Розена не гарантирует полного отделения ДНК от РНК. Кроме того, хлорная кислота как экстрагент в этом методе не полностью извлекает ДНК, оставляя прочно связанную ее часть в хроматине. [c.26] Вернуться к основной статье