ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Способы установления строения пептидов из "Основные начала органической химии том 1" Для установления строения пептида прежде всего определяют его аминокислотный состав. С этой целью пептид расщепляют на составляющие аминокислоты (как правило, путем кислотного гидролиза) и гидролизат анализируют методом бумажной хроматографии, электрофореза или ионообменной хроматографии. Для точного анализа этими методами требуются весьма малые количества пептидов (порядка десятых долей миллиграмма). [c.811] Пептид, укороченный на один аминокислотный остаток, обрабатывают фенилизотиоцианатом и еще раз повторяют все операции, отщепляя следующую аминокислоту. Практически удается провести 5—9 последовательных отщеплений аминокислот в пробе весом в несколько миллиграммов. [c.813] В последнее время разработан ферментативный метод установления чередования аминокислот в пептидах, начиная с Ы-концевой. Для этой цели исследуемый пептид подвергают гидролизу ферментом лейцинаминопептидазой, выделяемым из почек свиней. Этот фермент может расщеплять пептид лищь в том случае, если в а-положении к пептидной связи имеется аминогруппа. Вследствие такого специфического действия фермента в гидролизате, по мере протекания гидролиза появляются свободные аминокислоты, последовательно отщепляющиеся с аминного конца пептидной цепи. Наблюдая за процессом поочередного отщепления свободных аминокислот при помощи хроматографии, устанавливают последовательность расположения аминокислот в пептиде. [c.813] Обрабатывая полученную смесь каким-нибудь альдегидом, например энантолом, гидразиды аминокислот превращают в соответствующие гидразоны, легко отделяемые от незамещенной аминокислоты, которая идентифицируется хроматографически. Эта реакция получила название гидразинолиза. [c.813] Если пептидная цепь настолько длинна, что рассмотренные методы не позволяют полностью установить ее строение, полипептид осторожно гидролизуют (с применением специфических ферментов или другими методами), расщепляя его на небольшое число более коротких пептидов. Полученную смесь тщательно разделяют и анализируют выделенные пептиды, после чего устанавливают структуру исходного полипептида. [c.814] Вернуться к основной статье