ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Конформация присоединенного аффинанта из "Аффинная хроматография" Специфические взаимодействия биологических макромолекул основаны на комплементарности связывающих участков. Например, высокая реакционная способность специфических субстратов обусловлена наиболее благоприятной конфигурационной и кон-формационной ориентацией групп субстрата относительно комплементарно расположенных групп или центров фермента. [c.73] Таким образом, чем сильнее взаимодействие субстрата и ингибитора с ферментом, тем выше комплементарность связываю-ших участков. Это справедливо не только в отношении пространственного расположения, но также и в отношении природы комп-лементирующих частей молекул. Однако способы привязки аффинного лиганда к нерастворимому носителю в значительной степени ограничены, потому что лиганд должен быть привязан той частью молекулы, которая не принимает участия в связывании. Кроме того, иммобилизация аффинанта не должна приводить к изменению его конформации или отрицательно влиять на природу его связывающих участков. Эффективность аффинного сорбента зависит от степени, до которой эти требования выполняются. [c.73] Существенное значение способа присоединения нуклеотидов к нерастворимому носителю для эффективности хроматографии зависимых от пиридиннуклеотида киназ и дегидрогеназ показано исследованиями Гарвея и др. [8]. Сорбент -(6-аминогексил-)-АМР —сефароза содержит АМР, привязанную к сефарозе -аде-ниновой частью. [c.73] Высокомолекулярные аффинные лиганды обычно открывают больше возможностей для приготовления аффинных сорбентов. Ряд очень активных аффинных сорбентов получен при прямом присоединении белка к нерастворимому носителю (многочисленные примеры приведены в гл. 11, табл. 11.1). Однако в этом случае очень важным является условие, чтобы присоединение белка к нерастворимому носителю не приводило к изменению его нативной конформации. [c.74] Вернуться к основной статье