ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Другие методы количественной оценки взаимодействий с иммобилизованными аффинными лигандами из "Аффинная хроматография" Концентрационная зависимость [Связанный 5-белок]- от [Свободный S-белок] (рис. 4.5) линейна. Отрезки, отсекаемые па абсциссе и ординятр. дают соответственно Къ и [Весь S-пептид] Ч Конечно, это соотношение справедливо только для систем, для которых имеется уверенность, что нет никакой кеспецифпче-ской сорбции исследуемого белка. [c.58] Сравнивая связывание различных дегидрогеназ и киназ па N - (6-аминогексил) -5 -АМР—сефарозе и Р - (6-аминогексил) -Р -(5 -аденозин) пирофосфат—сефарозе, Харвей и др. [9] выразили силу взаимодействия между ферментом и иммобилизованным нуклеотидом с иомоплью так называемой связываемости . Этот параметр представляет собой концентрацию хлорида калия (мМоль/л) в центре пика фермента при элюировании фермента линейным градиентом концентрации КС1 (рис. 4.6 и табл. 4.2). Для определения константы диссоциации комплекса лактатдегидрогеназы с -(6-аминогексил)-5 -АМР, связанным с сефарозой, Лоу и др. [11] использовали линейную зависимость между количеством связанного фермента и концентрацией иммобилизованного нуклеотида. [c.58] Связываемость отражает меру силы взаимодействия фермента с иммобилизованным нуклеотидом и соответствует концентрации (ммоль/л) КС1 в центре пика фермента при элюировании фермента линейным градиентом концентрации K 1. На колонку (50X5 мм), содер-жащую 1 г аффинного сорбента, наносили 5 Е фермента. I — 1,5 мкмоль/мл АМР, II — 6,0 мкмоль/мл АМР. [c.60] Вернуться к основной статье