ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Кооперативное элюирование олигоадениловой кислоты в хроматографии на иммобилизованной полиуридиловой кислоте из "Аффинная хроматография" Метод анализа кривых элюирования применен в колоночной хроматографии олигоадениловой кислоты на агарозе со связанной полиуридиловой кислотой при нескольких температурах и концентрациях олигоадениловой кислоты. Теория кооперативного связывания олигонуклеотидов с полинуклеотидом была расширена таким образом, что эта хроматографическая система может быть описана теорией теоретических тарелок, как упоминалось в разд. 3.2. [c.55] Ряд термодинамических параметров был получен из экспериментальных изотерм связывания. Член был определен исходя из концентрации свободного олигомера в точке перегиба изотермы связывания, а член (4У2Уа)- — исходя из тангенса угла наклона изотермы связывания в этой точке. Такие приемы оправданны, если (т С 1. Для сг было найдено значение 0,017. [c.55] Полагая известным кооперативный параметр Ь (0,1—0,001), можно смоделировать изотерму связывания и кривые элюирования при этом полученные кривые элюирования будут иметь прямоугольный вид, поскольку при некоторой концентрации олигомера изотерма связывания резко стремится к нулю, что отражает влияние энтроппи образования петли из двух цепей полимера. Однако экспериментальные кривые элюирования не являются прямоугольными (рис. 3.10) и экспериментальная изотерма связывания не стремится резко к нулю (рис. 3.8). [c.56] По этому методу при / = 0,55 и с = 0,98-10 моль/л для 1 М раствора хлорида натрия при 10 °С найдено Х 5 = 3,4-10 л/моль ( 50%), а при 5°С х52 = 8-10 л/моль ( 50%). К сожалению, с, от которой зависит удовлетворительное соотношение сигнал — шум для кривой элюирования, недостаточно мала, чтобы можно было ограничиться двухчленным приближением. В результате траектория пика — вогнутая и оба значения нельзя определить с достаточной точностью, однако они очень приближенно соответствуют величинам, получаемым из изотермы связывания. [c.57] Вернуться к основной статье