ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Вытеснение из "Практическое руководство по жидкостной хроматографии" Неподвижную фазу пибо помещают в колонку, либо распределяют в виде тонкого открытого слоя. В последнем случае слой либо удерживается на стеклянной, металлической или пластмассовой подложке, как в хроматографии в тонком слое, либо сам является одновременно подложкой, как в хроматографии на бумаге. Ниже приведены основные методы проведения хроматографии в колонке и в тонком слое. [c.17] Неподвижную фазу распределяют в вице тонкого слоя на подложке из стекла, пластмассы или металла. Пробу наносят около одного края слоя, который затем погружают в подвижную фазу. Растворитель проходит через неподвижную фазу под действием капиллярных сил (восходящая или горизонтальная хроматография) или под действием силы тяжести (нисходящая хроматография). Компоненты пробы мигрируют через слой, но хроматографический процесс обычно прекращают до того, как растворенные вещества достигнут внешнего края слоя. Разделенные зоны исследуют in situ или же удаляют для дальнейшего изучения. [c.18] Количественный критерий степени разделения, достигаемой в хроматографическом процессе, необходим по меньшей мере по двум причинам. Во-первых, при наличии такого критерия экспериментатор может объективно оценивать влияние измёнения различных рабочих параметров и выбрать такие, которые приводят к лучшим разделениям. Во-вторых, зная эффективность разделения в колонке или в тонком слое образца смеси известного состава, можно предполагать, какова будет эффективность разделения другого образца. [c.18] В качестве критерия степени разделения широко используются две величины высота, эквивалентная теоретической тарелке (ВЭТТ), и разделительная способность (R). Эти величины могут быть связаны такими свойствами систем, как коэффициенты распределения. Однако мы не будем рассматривать подобные соотношения и посоветуем читателю обратиться к нескольким превосходным руководствам, лосвяшенным целиком этим вопросам (см. список дополнительной литературы в конце главы). Следует, однако, определить смысл двух вышеупомянутых терминов и привести способы расчета их величин. [c.18] Определение числа теоретических тарелок из элютивной хроматограммы. [c.19] ВЭТТ является суммарной характеристикой разделения, но ее величина зависит от времени удерживания разделяемого вещества. Однако в связи с тем, что при сравнении различных колонок их разделительная способность не увеличивается с возрастанием ВЭТТ, пользоваться этой характеристикой неудобно. Поэтому, чтобы эффективность разделения можно было сравнивать, лучше пользоваться критерием, непосредственно характеризующим способность системы разделить два компонента. Наиболее подходящим для этого параметром является разделительная способность. Эта величина все чаще используется в качестве критерия, с помощью которого в стандартизованных методах оцениваются газохроматографические колонки. Несомненно, в будущем он будет играть такую же роль в аддкостной хроматографии. Следует отметить, что.разделительная способность в отличие от ВЭТТ зависит как от селективности (разделение максимумов двух соседних пиков), так и от факторов, характеризующих качество выполнения разделения (ширина пика). [c.20] Определенную таким способом величину Л можно образно рассматривать как максимальное число дополнительно разделенных компонентов, которые могут быть размешены между двумя указанными компонентами. [c.20] Определение разделительной способности в элютивной хроматографии. [c.21] = Ко + КУ,, где У - объем неподвижной фазы в слое. [c.21] Очевидно, что для данной системы удерживание вешества может быть выражено в абсолютных (как объем элюента, необходимый для его элюирования), приведенных (как объем эшоента, необходимый для элюирования вешества, приходящийся на грамм неподвижной фазы) и относительных величинах (как отношение, скажем, абсолютных объемов удерживания растворенного вещества и вещества, вы-бранното для сравнения). [c.22] Пятно растворенного вещества. [c.22] Определение величины Кр ъ хроматографии в тонком слое. [c.22] Для характеристики поведения растворенных веществ в жидкостной хроматографии широко используются как абсолютный объем удерживания, так и относительные величины. Другим параметром удерживания, используемым особенно часто в хроматографии в плоских слоях (т.е. на бумаге или в тонком слое), является величина Кр отношение расстояния, которое растворенное вещество прошло за заданное время, к расстоянию, пройденному подвижной фазой. На рис. 1.6 показано, как измеряется величина Кр растворенного вещества в хроматографии в тонком слое. [c.22] В ряде случаев можно также использовать то обстоятельство, что введение данной функциональной группы в молекулу ведет к определенному изменению т.е. соответствует определенному Воспользовавшись табулированными значениями полученными для различных функциональных групп в одной или двух хроматографических системах, можно определить химическую природу неизвестного соединения. [c.23] Таким образом, основная мысль,приведенная в предществовав-ших разделах, заключается в том, что удерживание является характерным свойством растворенного вещества и систематически изменяется с изменением структуры. [c.23] Бегло ознакомившись с практикой хроматографии, в ней можно увидеть скорее искусство, чем науку. Несомненно, накопленный опыт часто определяет основное направление при постановке эксперимента. Теоретические соображения, даже элементарные, лишь в редких случаях играют главную роль при разработке и проведении хроматографического разделения. В жидкостной хроматографии это положение выражено более отчетливо, чем в газовой. В самом деле, несмотря на семидесяти - восьмидесятилетнюю историю, в жидкостной хроматографии ао середины 60-х годов почти не наблюдалось прогресса. Материалы и оборудование, используемые для большинства адсорбционных работ, проводимых в колонках, в настоящее время все еще мало отличаются от тех, которыми пользовались Дей и Цвет. [c.24] Мы решили написать эту книгу, чтобы показать читателю, что практические проблемы разделения можно решить более успешно, используя сушествуюшйгю теорию хроматографии и выпускаемые в настоящее время новые материалы (такие, как пористые полгпугеры, носители с контролируемой поверхностной пористостью, ионообменные смолы) с хорошо определенными химическими и физическими свойствами. [c.24] В этой главе будут рассмотрены основные процессы, протекающие при элюировании растворенных вешеств жидкостями через слои твердых частиц. [c.24] Экспериментальные факты, лежащие в основе современных знаний в этой области, получены в многочисленных исследованиях, выполненных в газовой хроматографии с газовыми подвижными фазами. Большая информация получена также в результате исследования химико-технологических процессов на слоях адсорбентов и катализаторов, а также при геохимическом изучении структур нефтяных полей. В последние годы были проведены основные исследования в области жидкостной хроматографии. В результате было подтверждено, что заключения, полученные на основе упомянутых выше исследований, справедливы и для жидкостной хроматографии. [c.24] Второй путь заключается в способе выполнения разделения. При тщательном приготовлении слоя неподвижной фазы и проведении операции элюирования можно разделеть материалы даже с крайне незначительными различиями в коэффициентах распределения. На практике обычно объединяют оба пути. Приведенные на рис. 2.1 диаграммы иллюстрируют возможные пути разделения. [c.25] Вернуться к основной статье