ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Биоспецифические сорбенты и носители для них из "Хроматографические материалы" Вследствие недостаточной устойчивости большинство активированных носи телей рекомендуется хранить при температуре fle выше 4—8 С. [c.222] Агарозные гранулированные гели (см. разд. 29) можно непосредственно использовать для приготовления биоспецифических сорбентов, применив бромциановый метод для активации носителя (см. разд. 125/1). Более надежные результаты, однако, получаются при использовании аминированных и других носителей, снабженных алифатической пространственной группой (подробно об этом см. в разд. 125). Одно из существенных преимуществ агарозных гелей как носителей для БСС является их практически неограниченная проницаемость для высокомолекулярных веществ. [c.222] Фирма BRL производит носители для БСС на основе агарозного геля Bio-Gel А-15гп, матрица которого сшита химическими поперечными связями (в отличие от обычных гелей для ГПХ, сшивка которых осуществляется водородными связями). Химическая сшивка приводит к значительному повышению стабильности геля без уменьшения его порозности или гидрофильного характера. Такие носители применимы в широком диапазоне pH (от 2 до 12), они устойчивы в спиртах, диметилформамиде и диоксане, их можно стерилизовать в автоклаве. Полное растворение носителя возможно в кислотах кипящей 1 М уксусной или холодной 10 М соляной. Предел эксклюзии геля-носителя равен 15 10 . [c.222] Сорбент устойчив при pH не ниже 3. Поставляют в набухшем состоянии с 0,1 М ацетатным буферным раствором (pH = 6), 1 Л1 по Na l, 0,02%-ным по мертиолату, 0,001 М по a lj, Mg l2 и Mn la (этот же раствор можно использовать для регенерации). Содержание лиганда около 8 мг/см . [c.226] Сорбент можно также использовать для. поглощения тиол-содержащих белков и ферментов с целью предохранения меркаптогрупп от блокирования или окисления, которые обычно приводят к инактивации этих веществ. [c.227] Поставляют в виде лиОфилизованного порошка со стабилизирующими добавками (отмываются водой перед использованием сорбента). Устойчив при хранении на холоду. Набухаемость 4 смУг, содержание активных групп 1 мкмоль/см . Выпускается с 1975 г. [c.227] Поставляют сорбент в виде лиофилизированного порошка с примесью декстрана и лактозы (стабилизаторов). Содержание белка А в сорбенте 7 мг/г, емкость поглощения человеческого IgG приблизительно 90 мг/г. Набухаемость геля 3,5 см /г. БСС устойчив в области pH от 2 до И. Активность сохраняется не менее 2 лет при хранении на холоду (от +3 до +8 °С). Производится с 1975 г. [c.227] Модифицированные полимеры на акриламидной основе (см. разд. 31, 87) намного превосходят по инертности целлюлозные носители неспецифическая адсорбция белков проявляется на них значительно слабее. Для иммобилизации крупных лигандов применяют также исходные, немодифицированные полиакриламидные гели (см. разд. 31) — посредством реакции с глутаровым альдегидом (см. разд. 125/11). [c.228] Аминированные и другие носители с привитыми активными группами предназначены для связывания лигандов через ковалентные связи. Сорбентам, nojiy4 HHHM на основе пористых стекол, присущи все основные преимущества, связанные с физическими свойствами этих носителей (см. разд. 35). Для получения БСС можно также использовать неактивированные пористые стекла, использовав их сорбционные свойства. Посредством водородных и ионных связей лиганды довольно прочно адсорбируются на стекле, но высушивать такие сорбенты нельзя. [c.228] Вернуться к основной статье