ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Другйе ионообменники из "Хроматографические материалы" Эфиры целлюлозы, получаемые в результате химического модифицирования целлюлозных порошков, широко используют в современной биохимии. Вследствие относительно низкой плотности ионогенных групп вероятность денатурирования сложных биохимических соединений при их поглощении на целлюлозах значительно ниже, чем при поглощении на ионообменных смолах. Десорбция поглощенных молекул происходит также в очень мягких условиях. Другим важным обстоятельством является проницаемость целлюлозы для весьма крупных молекул. [c.159] Ионообменные целлюлозы сильно набухают в воде, но слой в колонках гораздо меньше подвержен колебаниям в зависимости от ионной силы и pH растворов, чем у ионообменных гелей (см. разд. 94 и 95). [c.159] Производные целлюлозы немного уступают исходному материалу по химической стабильности, особенно по устойчивости в растворах щелочей и окислителей. Наименее устойчивы сильнокислотные и сильноосновные иониты. При длительном хранении с нейтральными растворами в результате деструкции целлюлозы в жидкой фазе могут появиться полисахариды в небольшой концентрации ( i0,003%). Микробиологическая устойчивость целлюлоз-ионитов обычно немного выше, чем исходной целлюлозы, но при длительных перерьшах в колонки все-таки нужно вводить антисептики. [c.159] Широкое применение ионообменных целлюлоз началось с середины 1950-х г. Промышленный выпуск целлюлозных ионитов впервые освоен в 1956 г, фирмой Serva [ФРГ]. [c.160] Ниже даны краткая характеристика и области применения отдельных ионообменных целлюлоз. [c.160] Р (ф о с ф о)-ц е л л ю л о 3 а. Активные группы ОРО (OH)j, бифункциональные сильно- и слабркислотные (p/ i = 1—3, = 6—7). Из-за гидролиза эфирных связей при промывании растворами щелочей с концентрацией выше 0,2— ,5 н. активность ионита снижается. Применяют для разделения низкомолекулярных веществ — основных пептидов и белков, фосфатов сахаров, нуклеотидов, гормонов, неорганических веществ. [c.160] СМ (карбоксиметил)-целлюлоза. Активные группы —ОСНаСООН, слабокислотные (рК = 3,5—4). Рабочая область pH 4—5, оптимальное значение pH 6. Применяют для разделения нейтральных и основных белков (альбуминов, гемоглобинов, ферментов), основных аминокислот и пептидов, нуклеиновых кислот, липидов, гормонов, а также клеток и их фрагментов. Используют также для распределительной хроматографии в полярных растворителях. [c.160] Е (E teol а)- целлюлоз а. Продукт реакции целлюлозы с эпи-хлоргидрином и триэтаноламином. Активные группы—смешанные амины, средне-и слабоосновные рК = 6—7,5). При поглощении крупных ионов проявляет молекулярно-ситовые свойства. Кинетика поглощения крупных ионов также сильно замедлена из-за поперечной сшитости Е-целлюлозы. Применяют для разделения нуклеиновых кислот, нуклеотидов, нуклеопротеидов, вирусов, белков, а также пептидов, аминокислот, полисахаридов и др. [c.161] Для приготовления пластин для ТСХ к ионообменной целлюлозе добавляют связующее — гипс или порошок микрокристаллической целлюлозы (I 4 по массе). Активировать слой, если это нужно, рекомендуют при 50 °С, в течение 40 мин. [c.166] Примечание. 4. Сорбент не содержит фосфатных групп и проверен на пригодность для ТСХ моно- и олигонуклеотидов. 19—21. Ионная форма ЫН ( 19), Ма + И ( 20), ОН ( 21). [c.167] Иониты на основе сефадексов 0-25 и 0-50 (см. разд. 28) и химически-сшитых агарозных гелей (см. разд. 30) по кислотно-основным свойствам аналогичны со ответствующим производным целлюлозы, которые описаны в разд. 84. В отличие от ионообменных целлюлоз, ионообменные декстрановые и агарозные гели обладают высокой емкостью обменного поглощения. Неспецифическая необменная поглотительная способность у них невелика. [c.167] К недостаткам ионообменных сефадексов относится сильная зависимость высоты слоя в колонке от pH, ионной силы и состава растворов (разд. 95). Агарозные ионообменные гели, полученные с использованием химической сшивки, мало изменяют свой объем в зависимости от этих факторов (приблизительно на 2% при изменении pH от 10 до 4). [c.168] Принципы подбора буферных растворов для хроматографии на ионитах-гелях те же, что и в случае ионообменных целлюлоз (см. разд. 84). Регенерацию выполняют 0,1—0,5 и. растворами НС1 или NaOH или 0,5—1 н. растворами солей. [c.168] По химической устойчивости ионообменные сефадексы почти не отличаются от неионных сефадексов (см. разд. 28). Агарозные иониты устойчивы в области pH от 3 до 10, выдерживают присутствие карбамида до концентрации 8 Л1, а также стерилизацию в автоклаве (до 110—120 °С при pH = 7,0). Рабочая термостойкость до 70 °С. В качестве антисептиков рекомендуется применять 0,02% NaNg при работе с катионитом и хлореток (1,1,1-трихлор-/прет-бутанол)—при работе с анионитом. [c.168] Вернуться к основной статье