ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Гидрофильные гели из "Гель-хроматография" Совершенно не ясно, каким образом вообще осуществляется взаимодействие между набухающими в воде гелями и ароматическими соединениями. Этот эффект можно подавить, вводя в элюент различные добавки. Создавая в элюенте высокую концентрацию роданида или мочевины, удается почти полностью нормализовать элюирование пикриновой кислоты и триптофана [52]. На сефадексе 0-25 в водно-спиртовой среде полифенолы ведут себя в соответствии с их молекулярным весом, ВТО время как в чистой воде они сильно задерживаются гелем [53]. Возможные активные центры геля не удается насытить путем добавления к элюенту ароматических соединений (например, 0,2 н. салицилата натрия) [42], однако в 1 М пиридине ди-нитрофенильные производные аминокислот появляются в элюате раньше, чем свободные аминокислоты. По-видимому, при хроматографировании в системе фенол — уксусная кислота — вода (1 1 1) гель уже не имеет сродства к ароматическим соединениям [54], Карнеги [55], работая на сефадексе 0-25 в этой системе (которая позволяет избежать побочных эффектов), сумел на ряде пептидов подтвердить обычную зависимость между объемами выхода и молекулярным весом (табл. 26). Он предполагает, что при молекулярном весе выше 400 имеет место собственно гель-хроматография, поскольку здесь уже не должен действовать эффект распределения [63]. Однако до сих пор все же не доказано, одинаков ли состав растворителя в гранулах геля и между гранулами. [c.130] Эти виды эксклюзии еще не получили объяснения. Возможно, они связаны с тем фактом, что упомянутые гели содержат небольшое количество карбоксильных групп (см. стр. 49). По-видимому, можно считать, что при малой нагрузке геля. и элюировании дистиллированной водой отрицательно заряженные карбоксильные группы слегка отталкивают анионы низкомолекулярных соединений от фазы геля [43]. В результате для этих соединений, так же как и для высокомолекулярных, объем выхода равен свободному объему Уо- Этот эффект может существенно исказить результаты при работе с радиоактивными анионами, например с иодидами [58]. При определенных обстоятельствах наличие радиоактивности в свободном объеме Уо может ввести в заблуждение, поскольку ее можно принять за меченые макромолекулы. Однако наличие в элюенте других электролитов полностью нормализует объемы выхода [43, 58]. Хотя гуминовые кислоты имеют ароматическую природу, они совершенно не проникают в гель декстрана при элюировании дистиллированной водой если же использовать солесодержащие элюенты, то с помощью гель-хроматографии удается определить молекулярный вес этих соединений [59]. [c.131] Естественно, что на катионы карбоксильные группы оказывают обратное воздействие. В среде, не содержащей солей, небольшие количества катионов очень сильно задерживаются гелем [43]. В присутствии большого избытка противоионов они вытесняются и элюируются, как обычно. Ионы тяжелых металлов иногда связываются гелем необратимо [60]. [c.132] Вернуться к основной статье