ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Теоретические аспекты гель-хроматографии из "Гель-хроматография" Гель-хроматография развилась в широко применяемый метод разделения из случайных наблюдений, без каких-либо предварительных теоретических обоснований. Чтобы лучше понять сущность протекающих при хроматографии процессов, можно (и нужно) опираться на результаты многих сотен опытов, подробно описанных в литературе. [c.114] Еще Флодин [1, 13] при систематическом изучении гель-фильтрации особо отмечал следующие основные положения. Объем выхода вещества определяется только размерами его молекул и почти не зависит ни от скорости элюирования, ни от концентрации вещества. (Разделение становится нечетким лишь в том случае, когда вязкость раствора образца намного превышает вязкость элюента [1].) Справедливость этих двух основных положений не подлежит сомнению. Лишь при фронтальном анализе белков на сефадексе G-100 [15] объем выхода в какой-то степени зависел от концентрации. Отсутствие зависимости между объемом выхода и скоростью движения элюента имеет решающее значение при обсуждении механизма процесса (см. далее) поэтому именно это положение проверялось особенно часто, и лишь немногим авторам удалось зафиксировать (совсем небольшие) воспроизводимые различия [12]. [c.114] В последнее время были предприняты попытки изучить влияние температуры на объем выхода. При хроматографировании белков на ксерогелях следует учитывать влияние повышенной температуры не только на объемные параметры молекулы [16], но и на степень набухания геля [17]. Калибровочная кривая элюирования полистиролов на стирагелях(фиг. 35)построена с учетом данных, полученных при трех различных температурах [18]. Эти результаты убедительно показывают, что объем выхода не зависит от температуры. [c.114] Очевидно, в этом случае он также определяется лишь размерами молекул. В гл. IV (табл. 23) будет подробно рассмотрено, как именно объем выхода связан с молекулярным весом. Здесь же, не вдаваясь в детали, можно лишь отметить, что объем выхода прямо пропорционален логарифму молекулярного веса. [c.115] Любая теория, касающаяся поведения на слое гранулированного геля веществ с различными размерами молекул, должна учитывать эти результаты. При экспериментальной проверке каждой новой теории с помощью стандартов следует иметь в виду, что результаты, не прошедшие статистической обработки, нельзя считать достаточно точными. В следующих разделах коротко рассмотрены различные подходы к созданию теории гель-хроматографии и дана их оценка в свете имеющихся экспериментальных данных. [c.115] Вернуться к основной статье