ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Получение хроматограммы на колонке и ее анализ из "Физико - химические методы анализа" Раствор анализируемой смеси веществ фильтруют через хроматографическую колонку. Вследствие различной адсорбируемости компонентов смеси в колонке образуются зоны. Однако полного разделения смеси при этом не произойдет, так как только первая, самая нижняя, зона будет содержать в чистом виде один наименее адсорбируемый компонент, вторая зона уже будет состоять из смеси двух компонентов, третья — из трех и т. д. Последняя, самая верхняя, зона будет содержать смесь всех компонентов. Таким образом, при получении первичной хроматограммы можно получить в чистом виде лищь часть одного из смеси веществ. [c.314] Однако уже первичная хроматограмма может дать ценные сведения о качественном и количественном составе анализируемой смеси. Промывание первичной хроматограммы чистым растворителем может привести к разделению зон, как полному, так и неполному. При неполном разделении зоны перекрываются. В молекулярной хроматографии возможно получить полное разделение смеси промыванием, если компоненты обладают достаточно различной адсорбционной способностью. В ионообменной хроматографии промывание приводит только к расширению зон. Особенность осадочной хроматограммы — получение чистых зон уже в первичной хроматограмме. В распределительной хроматографии для разделения смеси веществ используется только промывание. [c.314] Большое значение для хроматографического разделения имеет время прохождения раствора через колонку с сорбентом и концентрация компонентов смеси в анализируемом растворе. Бремя прохождения раствора через колонку зависит от площади поперечного сечения и скорости фильтрования на единицу площади. При увеличении скорости фильтрации уменьшается динамическая емкость ионита и увеличивается перекрытие отдельных зон. Скорость фильтрации устанавливается в каждом конкретном случае в зависимости от анализируемой смеси, от количества и качества сорбента и особенно от высоты колонки. Если колонка имеет высоту столба сорбента 10 см, то скорость пропускания раствора примерно составляет от 1 до 2 мл/см -мин. На основании теории полного обмена раствор смеси для хроматографического разделения должен быть разбавленным, так как величина ионообменной емкости ограничена. Однако в очень разбавленных растворах возникают процессы гидролиза, которые мешают ионному обмену. Оптимальные концентрации анализ ирумых ионов лежат в пределах от 0,05 до 0,1 и. Более концентрированные растворы рекомендуется разбавлять до этих концентраций. [c.315] Для выбора условий проведения хроматографического анализа, т. е. для изучения сорбции и десорбции каждого элемента в отдельности, строят выходные кривые. По оси абсцисс откладывают значение объема вытекающего из колонки раствора, а по оси ординат — концентрацию вымываемого вещества. [c.315] Анализ хроматограммы. Заключительной стадией хроматографического анализа смеси веществ является качественный и количественный анализ полученной хроматограммы. Хроматограмма, полученная на адсорбенте белого цвета, представляет собой серию цветных зон, расположенных в определенном порядке. Визуальное исследование такой хроматограммы дает ориентировочное представление о составе исследуемой смеси. Если разделяемые вещества флоуресцируют в ультрафиолетовом свете, расположение зон в колонке можно определить при помощи облучения ее ультрафиолетовыми лучами. Выявление зон бесцветных веществ осуществляется методом проявления хроматограммы. Для этого через хроматографическую колонку пропускают раствор, который дает окрашивание невидимых зон, или адсорбент обрабатывается перед началом хроматографирования соответствующим индикатором, который изменяет свою окраску в зависимости от среды образовавшейся зоны. [c.316] Количественный анализ хроматограммы целесообразно проводить лишь в том случае, когда осуществлено полное разделение смеси и хроматограмма состоит из серии отдельных неперекрывающихся зон. В этом случае анализ сводится к определению количества вещества, содержащегося в каждой зоне. Ориентировочные данные можно получить, измеряя ширину полосы при стандартном сорбенте, откалиброванном по данному веществу при постоянных условиях. Для этой цели может быть использовано измерение диэлектрической постоянной по длине колонки или применение метода счета импульсов при работе с радиоактивными изотопами и т. д. Широко применяется способ химического и радиохимического анализа отдельных зон, вырезанных из колонки. [c.316] Наибольшее распространение имеет метод фронтального анализа. Собирая последовательно в отдельные приемники одинаковые порции фильтрата, вытекающего из колонки, получают так называемую жидкостную хроматограмму. Собранные порции фильтрата подвергают количественному анализу обычными химическими или физико-химическими методами. Непрерывный анализ фильтрата в проточных кюветах методами рефрактометрии, спектрофотометрии, радиометрии и т. п. позволяет быстро получить данные о разделении смеси. [c.316] Вернуться к основной статье