ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Менингококковая инфекция из "Медицинская и санитарная микробиология" Отделяемое слизистой оболочки носовой части глотки снимают специальным клювовидным (изогнутым под углом) тампоном. Наиболее результативным является немедленный посев носоглоточной слизи на плотные питательные среды с тщательным разобщением бактериальных клеток. Если время доставки в лабораторию превышает 3 ч, то тампон помещают в пробирку с 3 мл среды обогащения (содержит 0,1 % агар-агара, 20 % сыворотки и 20 ЕД/мл ристомицина) и ставят в термостат при 37 °С (после подращивания материал высевают на сывороточный агар). [c.117] Микроскопия. Микроскопическое исследование спинномозговой жидкости и крови дает возможность определить наличие возбудителя. Если спинномозговая жидкость имеет вид гноя, то мазки готовят без ее предварительной обработки при незначительной мутности спинномозговую жидкость центрифугируют и из осадка делают мазки. Окрашивают их по Граму, водным раствором основного фуксина и/или метиленовым синим. При окраске по Граму форменные элементы спинномозговой жидкости могут изменяться, что осложняет обнаружение возбудителя. Менингококки имеют вид диплококков бобовидной формы, соприкасающихся вогнутыми краями и расположенных внутри цитоплазмы лейкоцитов. Часто обнаруживается нежная капсула. При менинго-кокцемии менингококки иногда можно обнаружить в мазках крови. Для этого готовят препарат толстой капли и без фиксации окрашивают его 2 — 3 мин водным раствором метиленовой сини, лишнюю окраску смывают водопроводной водой и высушивают препарат на воздухе. На голубом фоне препарата видны окрашенные в темно-синий цвет лейкоциты, а между ними множество мелких, темно-синих кокков, расположенных в виде кучек, парно или по одному. [c.117] Экспресс-диагностика основана на обнаружении в спинномозговой жидкости или крови больного специфического антигена, осуществляется с помощью латекс-агглютинации, ИФА, встречного иммуноэлектрофореза с групповыми преципитирующими антисыворотками. Эти методы приобретают особое значение при неэффективности микроскопической диагностики и посевов. [c.117] На 2 —3-й день инкубации менингококки образуют мелкие, круглые, выпуклые, прозрачные колонии. В мазках, приготовленных из этих колоний, обнаруживают полиморфные диплококки и тетракокки (картина настолько пестрая, что создается впечатление смешанной культуры). Колонии пересевают на скошенный сывороточный агар. Если в прямых посевах материала рост отсутствует, культуру выделяют из спинномозговой жидкости, залитой полужидким агаром (со среды обогащения). [c.118] На 3-й день исследования для идентификации чистой культуры у нее выявляют оксидазную активность и делают посев на среды с углеводами (табл. 2.4). Менингококки обладают оксидазой, ферментируют глюкозу и мальтозу с образованием кислоты, лактозу, сахарозу и фруктозу не ферментируют, полисахарид из сахарозы не образуют, не растут в присутствии 0,2 % желчи. Для выявления оксидазной активности на кусочек фильтровальной бумаги, смоченной каплей свежеприготовленного 1%-го раствора солянокислого парадиэтилфенилендиамина, петлей наносят культуру менингококков. Культуры, обладающие оксидазной активностью, в течение 30 — 60 с вызывают вначале порозовение, а затем почернение бумаги с реактивом. Для определения способности образовывать полисахарид культуры нейссерий засевают на бескрахмальную среду с 1 % сахарозы и инкубируют при 37 °С в течение 24 — 48 ч, после чего на рост наносят каплю йодного раствора Люголя. В случае образования полисахарида сразу развивается буро-лиловое окрашивание. [c.118] Для обнаружения менингококка в крови во флаконы с 50 мл бульона, содержащего 0,1 % агар-агара, засевают 5—10 мл крови, асептически взятой из вены. Через сутки делают пересев культуры на сывороточный агар. Выделение и идентификация культур осуществляются таким же образом, как и при исследовании спинномозговой жидкости. [c.118] Выделенную культуру типируют в РА с менингококковыми сыворотками к сероварам А, В н С. Серовар менингококка определяют с целью дальнейшего эпидемиологического анализа. [c.118] Серологическое исследование. Серодиагностику применяют в качестве вспомогательного метода (в основном для эпидемиологического анализа). Ставят РНГА с эритроцитами, нагруженными группоспецифическими полисахаридными АГ или ИФА с теми же антигенами. [c.120] Вернуться к основной статье