ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Гибридизация нуклеиновых кислот из "Медицинская и санитарная микробиология" Гибридизация — это процесс, в ходе которого одноцепочечная НК-мишень связывается с зондом — комплементарной молекулой, помеченной радиоактивным изотопом или ферментом. В качестве зондов могут использоваться как ДНК, так и РНК. ДНК-зонды являются двухцепочечными и перед применением их необходимо денатурировать (например, нагреванием), чтобы получить одноцепочечные фрагменты. [c.96] РНК-зонды, как правило, одноцепочечные молекулы, и их денатурация перед применением не требуется. Поскольку в исследуемом материале, как правило, присутствует множество различных НК, зонд должен вначале отыскать в этой сложной смеси своего комплементарного партнера и только потом образовать с ним комплекс. [c.96] Если гибридизация проводится не в растворе, а на фильтрах, этот метод называют блот-гибридизацией. [c.96] Саузерн- и Нозерн-блоты позволяют обнаружить изменения в размере молекул, т.е. выявить возможные структурные нарушения. Как правило, эти модификации используются для выявления генетических нарушений на уровне макроорганизма и потому подробно здесь не рассматриваются. [c.97] Методика дот-блот гибридизации ДНК. Исследование проводят в несколько этапов. [c.97] Дот-блот гибридизация РНК проводится практически по той же схеме, но для денатурации РНК используют глиоксаль или формальдегид, а гибридизацию проводят при 42 °С. [c.97] Вернуться к основной статье