ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы НЕКОТОРЫЕ ОСОБЕННОСТИ АППАРАТУРЫ ВЭЖХ ПРИ ИДЕНТИФИКАЦИИ И КОЛИЧЕСТВЕННОМ АНАЛИЗЕ КОМПОНЕНТОВ РАЗДЕЛЯЕМЫХ СМЕСЕЙ из "Высокоэффективная жидкостная хроматография на микроколоночных хроматографах серии Милихром" Задачу оптимизации при разработке хроматографических условий методики можно сформулировать так необходимо получить хорошее разрешение (разделение) интересующих нас хроматографических пиков в разумно короткое время при доступном давлении в жидкостной системе и не слишком большой длине колонки. [c.29] В конкретном случае в реальной лаборатории длина колонки и доступное давление уже определены аппаратурными возможностями. [c.29] Вопрос о природе селективности разделения есть основной вопрос любого физико-химического исследования в хроматографии, особенно в жидкостной хроматографии, где селективность во многом определяется структурой раствора элюента и взаимодействием элюента с адсорбатом и адсорбентом. В общем случае принято говорить, что селективность есть конечный результат действия межмолекулярных взаимодействий типа адсорбат-элюент , элюент-адсорбент , адсорбат- адсорбент и адсорбат-элюент-адсорбент . Проблему регулирования селективности при разработке хроматографических методик можно обозначить очень просто каким образом составить оптимальную хроматографическую систему, используя 2-3 коммерческих адсорбента н набор стандартных для ВЭЖХ растворителей. [c.30] Силасорб-600 имеет удельную поверхность 550-600 м г, диаметр пор 60-100 А, частички адсорбента неправильной (нерегулярной) формы. [c.31] Силасорб 8РН 600 имеет частички регулярной (сферической) формы. [c.31] Элюирующей силой е элюента называется способность элюента (растворитель или смесь растворителей) вытеснять адсорбат с поверхности адсорбента. Считается, что чем прочнее элюент адсорбируется на адсорбенте, тем больше его элюирующая способность. Расположенные в ряд по возрастанию элюирующей силы растворители образуют так называемый элюотропный ряд. Элюотропный ряд для силикагеля приведен в табл.4.1. [c.32] Чем прочнее элюент адсорбируется на неподвижной фазе, тем больше его элюирующая сила. Это правило выражено в виде элюотропного ряда Снайдера [ 6]. [c.33] Примечание. Элюотропный ряд растворителей хорошо работает в вытеснительном режиме десорбции и отражает энергию взаимодействия элюент - поверхность силикагеля . Чем больше эта энергия, тем больше элюирующая сила растворителя в вытеснительном режиме элюирования. Под вытеснительным режимом десорбции мы понимаем десорбцию за счет конкуренции молекул элюента и адсорбата за место непосредственно на поверхности гидроксилированного силикагеля. Вытеснительный режим десорбции адсорбата элюентом с поверхности силикагеля является одним из вариантов десорбции в ВЭЖХ на силикагеле (в практической хроматографии - далеко не основным), поэтому определение элюирующей силы, основанное на понятии элюотропный ряд , не является универсальным. [c.33] Фактически из однокомпонентных растворителей в качестве элюента могут применяться только углеводороды, такие как н-пентан или н-гексан, для анализа ароматических углеводородов. Воспроизводимость такого анализа невелика из-за неконтролируемого содержания воды в элюенте и на поверхности силикагеля в хроматографической колонке. [c.34] В большинстве других случаев в качестве элюентов используются смеси растворителей, где основой элюента являются углеводороды, а плавное увеличение элюирующей силы достигается добавкой растворителя (см. табл 4.1), имеющей большую элюирующую силу, чем пентан или гексан. Такой компонент элюента называется ПОЛЯРНОЙ ДОБАВКОЙ. [c.34] В ВЭЖХ на силикагеле элюенты формируются на основе неполярных растворителей. Увеличение элюирующей силы достигается за счет увеличении концентрации полярной добавки в элюенте. При равной элюирующей силе двух элюентов концентрация более сильной полярной добавки всегда меньше концентрации полярной добавки с меньшей элюирующей силой. Увеличение элюирующей силы в первую очередь сказывается на уменьшении времен удерживания адсорбатов и, соответственно, факторов емкости К (рис. 4.2). [c.34] Адсорбционный слой организуется введением в элюент полярных добавок, имеющих структуру растворов, близкую к структуре адсорбата в растворе. Такой адсорбционный слой блокирует поверхностные ОН-группы силикагеля и превращает поверхность силикагеля в однородно заряженную, причем молекулы адсорбата не могут ни деблокировать поверхность силикагеля, ни встроиться в адсорбционный поверхностный слой [7]. [c.36] Это правило имеет важнейшее значение не только для хроматографии на силикагеле, но и для хроматографии на алкил-модифицированных силикагелях, хотя наиболее ярко эффект адсорбционной модификации проявляется именно в хроматографии на силикагеле. Нет ни одной хорошо воспроизводимой хроматографической методики на силикагеле, в которой не использовался бы этот принцип - в явном или неявном виде. Наоборот, любая методика, выполненная на хроматографических колонках, заполненных силикагелем без использования адсорбционного модифицирования, имеет крайне низкую воспроизводимость времен удерживания, высот и площадей хроматографических пиков. [c.36] Адсорбционная модификация достигается путем добавления в элюент уксусной ми пропионовой кислоты [8], в меньшей степени -воды [9], ДИЭТИЛ-, триэтиламина или диметилформамида [7] (для анализа соединений, имеющих основной характер). Объемное содержание в элюенте для кислот и аминов - от 0,25 до 5%, воды - от 0,15 до 2% (рис. 4.3). [c.36] Примечание. Применение адсорбционно-модифицированного силикагеля требует от хроматографиста выполнения одного очень важного условия для каждого элюента, предназначенного для анализа определенного вещества, необходима индивидуальная хроматографическая колонка. Регенерация хроматографической колонки в данных условиях обходится значительно дороже, а результат регенерации не гарантирован. [c.36] В тех случаях, когда необходимо уменьшить время удерживания адсорбата без существенного ухудшения разрешения, в элюент добавляют вещества, способные образовывать цепочные ассоциаты в растворе. К таким веществам, в первую очередь, относятся спирты - метанол и 2-пропанол [10] (рис. 4.4). Содержание спиртов в элюенте может изменяться от 0.5 до 20% по объему. [c.37] Для увеличения селективности разделения в элюеит добавляются вещества, способные к образованию л-комплексов (ассоциатов) [11] в растворе с я--электроиной системой адсорбатов. Большой способностью к образованию такого рода ассоциатов обладают хлористый метилен и хлороформ (рис.4.5). [c.39] На хроматограмме хорошо видно улучшение селективности на хроматограмме б - практически за то же время анализа, что и на хроматограмме а. [c.40] Вернуться к основной статье