ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Количественное определение микроорганизмов из "Физико-химические и биологические методы оценки качества лекарственных средств" Испытание проводят двухслойным агаровым методом в чашках Петри диаметром 90—100 мм. Образец лекарственного средства в количестве 10 г (мл) растворяют, суспендируют или эмульгируют в фосфатном буферном растворе с pH 7,0 так, чтобы конечный объем раствора (суспензии, эмульсии) был 100 мл. Посевы просматривают ежедневно. [c.335] Определение общего числа бактерий. Приготовленный раствор (суспензию, эмульсию) образца вносят по 1 мл в каждую из двух пробирок с 4 мл расплавленной и охлажденной до температуры от 45 до 50 °С среды 1. Содержимое пробирок быстро перемешивают и переносят в чашку Петри, содержащие 15—20 мл застывшей питательной среды 1. Быстрым покачиванием чашек Петри равномерно распределяют верхний слой агара. После застывания среды чашки переворачивают и инкубируют в течение 5 сут при температуре от 30 до 35 °С. Через 48 ч и окончательно через 5 сут подсчитывают число бактериальных колоний на двух чашках, находят среднее значение и, умножая его на показатель разведения, вычисляют число бактерий в 1 г (мл) образца. [c.335] Для получения достоверных результатов учитывают только те чашки, на которых выросло от 30 до 300 колоний. Если при разведении образца 1 10 нет роста, результаты отмечают следующим образом В 1 г (мл) лекарственного средства (сырья) менее 10 бактерий . [c.335] Если число колоний на чашке превышает 300, делают ряд дальнейших последовательных разведений образца (1 100, 1 1000 и т. д.), выбирая для посева разведение, наиболее соответствующее указанному выше уровню [11]. [c.335] Образец в количестве 10 г (мл) вносят в 100 мл питательной среды 8, перемешивают и инкубируют при температуре от 30 до 35 °С в течение 24—48 ч. При наличии роста делают пересев петлей на среды 9 и 10, разлитые в чашки Петри. Посевы инкубируют при температуре от 30 до 35 °С в течение 24—48 ч. [c.337] В 1 г (мл) лекарственного средства для приема внутрь допускается наличие не более 1000 бактерий и 100 дрожжевых в плесневых грибов (суммарно). [c.338] В 1 г (мл) лекарственного средства для применения в полости уха, носа, для интравагинального использования и для местного употребления допускается наличие не более 100 мнкроорганяз-мов, в том числе и грибов. [c.338] Тест на наличие нитритов. К суточной исследуемой культуре бактерий на среде 7 приливают 0,2—0,3 мл реактива Грисса, погружая пипетку до дна пробирки. Появление красного окрашивания свидетельствует о наличии нитритов. [c.338] Тест на наличие цитохромоксидазы. Полоску фильтровальной бумаги смачивают реактивом в наносят платиновой петлей или стеклянной палочкой суточную чистую культуру исследуемых бактерий со скошенной среды 1. Синее окрапшваши, появляющееся через 2—5 мин, свидетельствует о положительной оксидазной реакции. [c.338] Для удобства постановки реакции плазмокоагуляцин можно использовать сухую кроличью цитратную плазму промышленного производства, которую разводят согласно наставлению по применению. [c.339] Питательные среды Питательные среды должны обеспечивать рост и развитие определенных микроорганизмов. Готовить питательные среды следует, строго придерживаясь приведенной рецептуры. Компоненты питательных сред должны соответствовать ГОСТу и ТУ (табл. 10.13). [c.339] К мясной воде прибавляют пептон и натрия хлорид, растворяют при нагревании, вносят глюкозу, устанавливают pH, кипятят в течеиие 1 мин, прибавляют замоченный заранее агар, нагревают до поЬхного его расплавления, фильтруют через ватно-марлевый фильтр. Стерилизуют в паровом стерилизаторе насыщенным паром под давлением при температуре 121 °С в течение 15 мин. [c.339] Все ингредиенты растворяют в воде, прибавляют замоченный заранее агар, нагревают до полного его расплавления, фильтруют через ватно-марлевый фильтр. Стерилизуют в паровом стерилизаторе насыщенным паром под давлением при температуре 121 °С в течение 15 мин. Для подавления роста бактерий после стерилизации насыщенным паром под давлением прибавляют 100 мг бен-зилпенициллина и 100 мг тетрациклина (либо перед стерилизацией насыщенным паром под давлением — 50 мг левомицетина) на 1000 мл среды. [c.339] Вернуться к основной статье