ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Принцип метода биологической оценки сердечных гликозидов из "Физико-химические и биологические методы оценки качества лекарственных средств" Биологическая оценка сердечных гликозидов основана на способности сердечных гликозидов вызывать в токсических дозах систолическую остановку сердца животных. [c.283] Активность сердечных средств оценивают по сравнению с активностью стандартных образцов и выражают в БД. [c.283] Испытания проводят на лягушках, кошках или голубях. Устанавливают наименьшие дозы стандартного образца и испытуемого препарата, вызывающие систолическую остановку сердца подопытных животных. Затем рассчитывают содержание ЕД в 1 г исследуемого средства, если испытываются лекарственные растения или сухие концентраты в одной таблетке — при испытании таблеток или в 1 мл, если испытываются жидкие лекарственные формы. [c.283] Стандартными образцами при испытании листьев и препаратов наперстянки пурпуровой и крупноцветковой, травы, цветков, листьев и препаратов ландыша служат специально изготовленные спиртовые экстракты из названных растений, содержащие сумму гликозидов и очищенные от сопутствующих веществ. [c.283] При испытании на лягушках разведения стандартных образ-цов подбирают с таким расчетом, чтобы одна лягушачья единица действия (1 ЛЕД) соответствовала дозе стандартного Ъбразца, вызывающей в определенных условиях опыта систолическую остановку сердца у большинства подопытных стандартных лягушек. [c.284] Под 1 ЛЩ( наперстянки и ландыша подразумевают специфическую биологическую активность 0,3 мл стандартного образца, разведенного в 4 раза водой. Неразведеиные стандартные образцы наперстянки и ландыша содержат в 1 мл 13,33 ЛВД. [c.284] При испытании сердечных средств на кошках и голубях активность препарата выражают в кошачьих и голубиных БД. [c.284] Под одной кошачьей или голубиной единицей действия (1 КЕД, 1 ГЕД) подразумевают дозу стандартного образца или испытуемого препарата из расчета на 1 кг массы животного или птицы, вызывающую систолическую остановку сердца кошки или голубя и устанавливаемую в определенных условиях опыта. Эта доза является смертельной. [c.284] Разведения стандартного образца или испытуемого препарата подбирают с таким расчетом, чтобы 1 КЕД или 1 ГЕД содержались примерно в 15 мл раствора [11]. [c.284] Лягушек содержат в течение зимы в бассейне с проточной водой в полутемном помещении при температуре от 3 до 8 °С. [c.285] Сохраняемые в бассейне лягушки зимой могут быть непосредственно использованы для опыта. Весной и летом лягушки должны быть свежепойманными и выдерживаться до опытов в бассейнах с проточной водой в течение 2—3 суток. Температура воды в бассейне в теплое время года не должна превышать 15 °С. Помещение лаборатории, где проводят биологические испытания, должно быть светлым, но защищенным от попадания прямых солнечных лучей, температура воздуха в нем 15—22 °С. В лаборатории должна быть раковина для содержания подопытных лягушек, в которую их помещают за 1—1,5 ч до проведения опыта. [c.285] Отбирают партию лягушек одного вида, возможно близких друг к другу по массе. Взвешивание животных проводят непосредственно перед опытом с точностью до 0,5 г с отклонениями от средней массы в группе не более чем на 2,5 г 28—33, 30—35, 35—40,. .., 65—70 г. [c.285] Лягушек (5 или 10) укрепляют на досках брюшком кверху с предельно вытянутыми конечностями, булавки вкалывают в верхнюю часть морды и в суставы передних и задних конечностей. Пинцетом захватывают кожу на груди и вырезают в ней прямоугольное отверстие. Вырезанный лоскут кожи откидывают в сторону. При этом становится отчетливо видимой грудина, просвечивающая через мышцы в виде белой пластины, напоминающей по форме песочные часы. Приподняв пинцетом грудину в узкой части, тонкими ножницами перерезают ее поперек выше и ниже места наложения пинцета так, что образуется узкое поперечное оконце, через которое видны дуги аорты и предсердия. Тонким (глазным) пинцетом проникают в разрез (осторожно, чтобы не поранить предсердия и крупные сосуды), слегка вытягивают сердечную сорочку и рассекают ее ножницами. Затем легкими надавливаниями на брюшко лягушки выводят сердце наружу. При препарировании следят за тем, чтобы через образованное отверстие не выступали наружу печень и легкие и чтобы сердце свободно помещалось на лишенном кожи участке, не прикасаясь к наружной поверхности кожи. В течение опыта обнаженное сердце каждые 15—20 мин смачивают 0,6 %-ным раствором натрия хлорида (наносят пипеткой 2—3 капли). [c.285] Лягушкам, относящимся к одной группе (5 шт.), вводят одинаковые дозы испытуемого раствора. [c.286] Препараты, подлежащие испытанию, предварительно разводят водой с таким расчетом, чтобы 0,3 или 0,4 мл испытуемого раствора соответствовали 1 ЛЕД. Для этого среднее количество единиц действия препарата умножают на количество миллилитров, соответствующее 1 ЛЕД. Например, в 1 мл раствора коргли-кона 0,06 %-ного для инъекций содержится в среднем 13,3 ЛЕД (13,3 0,3 = 3,99, т. е. разведение препарата 1 4). [c.286] После введения раствора наблюдают за лягушками и определяют наименьшую дозу, вызывающую систолическую остановку сердца у большинства (3—4) из 5 лягушек данной группы в течение 1 ч, если испытывают сырье и препараты наперстянки, ландыша, горицвета, или в течение 2 ч, если испытывают сырье и препараты строфанта, желтушника. Если в течение этого времени отчетливой остановки сердца не произошло, продолжают наблюдение еще 10 юин (при длительности наблюдения 1 ч) и зачитывают также количество лягушек, у которых остановка сердца наступила в дополнительное время. Длительность систолической остановки сердца должна быть не менее 15 мин. Лягушек, у которых сердце начинает вновь сокращаться ранее, чем через 15 мин после остановки, в расчет не принимают. [c.286] Далее рассчитывают содержание единиц действия в 1 мл, 1 г иди 1 таблетке испытуемого препарата. [c.287] Для определения наименьшей дозы раствора стандартного образца и испытуемого препарата травяным лягушкам вводят примерно 0,2 мл препарата наперстянки, ландыша, горицвета или 0,3 мл препарата строфанта, желтушника. Допустимое отклонение между вводимыми дозами — 0,02—0,03 мл. [c.287] Вернуться к основной статье