ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Техника хроматографического разделения из "Лабораторные работы по органической химии" В случае окрашенных веществ можно наблюдать передвижение и выход зон чистых компонентов из колонки (рис. 57, г). В этом случае отбирают фракции элюента, соответствующие зонам отдельных компонентов, и, отогнав элюент, получают чистое вещество. [c.44] Если зоны компонентов перемещаются по колонке очень медленно, то следует применять разборную колонку (см. рис. 57, в). В этом случае из колонки полностью отсасывают элюент колонку разбирают, осторожно выталкивают столбик сорбента и разрезают его на части, соответствующие зонам чистых компонентов, затем из этих частей подходящим раство-рителш экстрагируют ад-Этемп, мл сорбированные вещества. [c.44] В этом случае неподвижной фазой является вода, адсорбированная бумагой, или органическая жидкость, которой бумага пропитана. Иногда бумагу модифицируют, например обрабатывают уксусным ангидридом. При этом гидроксильные группы целлюлозы превращаются в сложноэфирные, что приводит к изменению сорбционных свойств бумаги. [c.45] Зоны отдельных компонентов проявляются в виде пятен (рис. 60). [c.46] Бумажная хроматография может быть использована и для препаративных целей Однако этот метод выделения веществ из смеси трудоемок и малопроизводителен. [c.46] В тонкослойной хроматографии используется два типа слоев, получивших название незакрепленный и закрепленный, которые наносятся на стеклянную пластинку или какую-либо другую подложку. [c.46] При приготовлении хроматографической пластинки с закрепленным слоем адсорбент смешивают с каким-либо вяжущим веществом, чаще всего с гипсом или крахмалом. При этом количество вяжущего вещества обычно составляет около 5% от веса сорбента. Из см си сорбента с вяжущим веществом готовят суспензию в воде, смеси хлороформа и метанола или в другой жидкости, и поливают этой суспензией пластинку, находящуюся в строго горизонтальном положении. Постепенно суспензия затвердевает и образуется закрепленный слой сорбента. [c.47] Пластинка с закрепленным слоем сорбента может быть приготовлена и другим способом в суспензию сорбента и вяжущего вещества в смеси хлороформа и метанола вертикально погружают стеклянную пластинку, медленно и плавно ее вынимают и держат в горизонтальном положении, пока не образуется закрепленный слой. [c.47] Чтобы нанести на хроматографическую пластинку исследуемый продукт, его растворяют и полученный раствор набирают в капиллярную трубку. Осторожным прикосновением капиллярной трубки к сорбенту раствор наносят на хроматографическую пластинку. При этом не должно нарушаться равномерное распределение сорбента на пластинке. На одну хроматографическую пластинку можно нанести несколько проб при условии, что расстояние между ними будет не менее 2 см. Содержание веществ в пробе должно находиться в пределах от 0,5 до 50 мкг. При перегрузке хроматограммы получается искажение результата. [c.47] После нанесения на слой сорбента исследуемого вещества или смеси веществ пластинку помещают в камеру с элюентом, причем стартовая линия не должна соприкасаться с элюентом, после чего камеру герметично закрывают. Пластинку с незакрепленным слоем располагают наклонно, угол ее наклона должен быть таким, чтобы сорбент не сползал с пластинки. Пластинки с закрепленным слоем могут находиться в почти вертикальном положении. [c.47] Выбор элюента определяется природой хроматографируемого вещества и характером сорбента. По увеличению элюирующей способности растворители могут быть расположены в следующий ряд -гексан, гептан циклогексан четыреххлористый углерод бензол хлороформ диэтиловый эфир этилацетат пиридин ацетон этанол метанол вода. [c.47] Как и в бумажной хроматографии, положение пятна на тонкослойной хроматограмме характеризуется фактором замедления Бесцветные вещества на хроматограмме с закрепленным слоем могут быть обнаружены при опрыскивании хроматограммы растворами реагентов, образующих с исследуемыми веществами окрашенные продукты. Для этой цели может быть использована концентрированная серная кислота, под влиянием которой на хроматограмме в местах нахождения органических веществ образуются темные пятна. Применять опрыскивание для проявления хроматограмм с незакрепленным слоем нельзя. [c.48] Для проявления парами иода хроматографическую пластинку на 10—15 мин помещают в эксикатор с иодом. Затем пластинку вынимают, иод улетучивается и в тех местах, где находилось органическое вещество, появляются окрашенные пятна. [c.48] Если исследуемое вещество поглощает в УФ-области, то для приготовления хроматографических пластинок используют адсорбент, содержащий флуоресцирующее вещество. Хроматограммы, полученные на таких пластинках, рассматривают в УФ-свете. [c.48] Вернуться к основной статье