ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Количественое определение веществ в зонах хроматографии на бумаге из "Справочник по физико-химическим методам исследования объектов окружающей среды" реагент наносят на бумагу, погружая сс в раствор реагента, или опрыскивая хроматограммы этим раствором. При подобной обработке реагент полностью не проникает внутрь волокон бумаги и к подсушенному соединению. Реакция часто наблюдается только в том случае, когда бумага становится сухой или почти сухой. Даже при успешном развитии окраски образовавшиеся производные Часто неустойчивы и существуют короткое время. Ход реакции зависит от концентрации исходного соединения в зоне хроматограмм. Одпако, несмотря на все отмеченное, хроматография на бумаге приводит к хорошим результатам. [c.262] Точность в значительной степени зависит от природы анализируемого вещества и особенностей выбранного метода. [c.262] При низком С0держан11н определяе.мых компонентов в зонах в этих словиях реакция с образованием окрашенных производных протекает полно, при высоких концентрациях веществ в зонах хроматограмм наблюдается частичное превращение соединения в окрашенное производное (рис. 95). Это приводит к понижению чувствительности определенпя при более высоких концентрациях вещества в зоне, а также к значительным колебаниям в количестве образующегося окрашенного производного. Стедовательно, концентрация проявителя должна быть достаточной для того, чтобы наиболее полно произошло превращение соединения в окрашенное производное прп высокой концентрации соединения в зоне. [c.262] В конкретных хроматографических системах количество образующегося окрашенного производного с увеличением концентрации проявителя линейно возрастает, пока не достигнет постоянной величины (рис. 96). Поэтому для количественного аналнза обычно применяют растворы проявителя более высокой концентрации, чем для качественного (примерно в 5—10 раз). Однако с резким повышением концентрашп реагента резко увеличивается и окраска фона. В связи с этим проблема оптимальной концентрации реагента весьма актуальна. [c.262] Так как после хроматографического разделения пустые участки хроматограмм служат фоном для сравнения, следует стремиться к то.му, чтобы этот фон был постоянным. [c.262] Существуют два способа проявления опрыскивание проявите.тем погружение в раствор проявителя. [c.262] Обычные прие.мы выдувания ртом или грушей не обеспечивают равномерного распределения проявителя на поверхности бумаги. Если источник света помещать позади хроматограмм, то равно.мерное опрыскивание облегчается. [c.263] Очень хорошие результаты дает второй способ, особешю если реагент растворен в летучих растворителях, Прн выборе нос.тедннх предпочтение отдают такому растворителю, в котором анализируемое соединение растворяется ограниченно. [c.263] Сравнительные данные о влиянии вре.мени, прошедшего с момента проявления хроматограммы, на интенсивность окраски зоны исследуемого вещества и фона. [c.263] Если окраска производного очень неустойчива, то количественный анализ проводят путем фотографирования хроматограммы в момент максимального развития окраски зон. Для повышения контрастности при фотографировании используют соответствующие светофильтры. Далее количественный анализ выполняют путем измерения площади пятен или денситометрически. [c.264] При образовании окрашенного производного возможны три обычных типа взаимодействия. Рассмотрим каждый из них в отдельности. [c.264] Первый тип взаимодействия встречается в области низких концентраций ана -лизируемых веществ, когда полученная окраска точно соответствует количеству нанесенного на хроматограмму вещества. В этом случае полагают, что соединение прореагировало полностью. Применение этого типа ограничено, однако для сани-тарно-химического анализа он может иметь первостепенное значение. Чаще всего он имеет место при двухмерном процессе развития хроматограмм. [c.264] Второй тип взаи.модействия наблюдается, когда в области низких концентраций вещества в зоне количества образовавшегося продукта реакции вначале линейно зависит от содержания вещества, а затем эта зависимость отклоняется от линейной при повышении концентрации. Во избежание этого можно изменить природу растворителя (использовать растворитель с меньшей скоростью испарения с бумаги) или выдерживать хроматограммы во влажной атмосфере. [c.264] Третий тип, являющийся аномальным, редко встречается в практике санитарно-химических лабораторий (например, при определении концентраций лекарственных препаратов в воздушной среде). При низком содержании вещества в зоне реакция протекает полностью, однако при концентрации вещества в зоне выше определенной наблюдается понижение интенсивности окраски зоны по мере дальнейшего увеличения вещества в зоне. Это обусловлено главным образом тем, что концентрация вещества в зоне вполне достаточна для торможения реакции образования окрашенного комплекса (рис. 99). [c.264] Последний метод является приближенным, однако при оптимальных условиях можно добиться точности —25 (). [c.264] Однако первостепенное значение имеет стандартизация условий диффузии вещества в зонах. Последние в процессе развития хроматограмм становятся все более диффузными, иными словами происходит как бы уменьшение концентрации вещества в единице поверхности бумаги, что сказывается на количестве производного, образующегося при проявлении хроматограмм. [c.265] При чрезмерном подсушивании феном бумага может настолько обезвожиться, что при последующем нанесении в ту же самую точку на линии старта раствора последний поглощается быстрее, чем предыдущая его часть, и образуются начальные пятна меньшего размера. [c.265] В состав элюирующего раствора мол но ввести дополнительное количество реагента, образующего окрашенное соединение с анализируемым веществом. При этом определяе.мое вещество полностью превращается в производное, несмотря на то, что при детекции реакция могла пройти не полностью и аномально. [c.265] Метод количественного определения по измерению площади зон дает обычно точность 5—10%. [c.265] При нанесении серии стандартных растворов в виде небольших одинакового размера пятен и измерении площадей зон, полученных после развития и проявления хроматограмм, можно показать, что в узком интервале концентраций площади зон пропорциональны логарифму концентрации вещества в зоне (рис. 100). Площадь зоны определяют либо планиметрически, либо путем измерения большой и малой оси зоны. Произведение последних можно принять за площадь зоны. [c.265] Вернуться к основной статье